肾癌干细胞的鉴定及其生物学特性研究

本项目拟将新鲜肾癌组织制备成组织碎块和细胞悬液,组织碎块通过组织块移植法在重度免疫缺陷型NOD/SCID小鼠建立肾癌模型;细胞悬液通过免疫磁珠法分离出表达不同标志物PAX-2、CD133、Msi-1、CD117、URO10/URO8、TGF-α；Hh、Wnt和MYC基因的细胞，分别将表达不同标志物的肾癌细胞皮下接种于NOD/SCID小鼠建立肾癌模型，检测表达不同标志物的肾癌细胞的异种动物接种致瘤性;将不同处理组小鼠肾癌肿瘤组织与手术直接切除的肾癌组织通过免疫组化法比较表达的标志物是否有差异，初筛出肾癌干细胞；分别以细胞克隆形成率;绘制生长曲线、测定分化活性、DNA倍体测定等方法对细胞进行鉴定及生物学特性研究。研究目标是从肾癌组织筛选、鉴定分离出肾癌干细胞并对其生物学特性进行研究,探讨肾癌干细胞与肾癌发生的关系,进一步揭示肾癌发生病理机制,从而为开发肾癌特异性诊疗方法奠定理论基础。