IL-21在HCV特异性CD8+T细胞功能衰竭中的作用

Hepatitis C virus-specific CD8+T cells play an vital role in control virus replication and in virus clearance. The exhaustion of HCV-specific CD8+T cells is an pivotal cause in failure to eliminant HCV and resulting in HCV persistant infection. Recently, many evidences about IL-21 multifunction and multieffect indicate that IL-21 contribute to virus clearance and virus chronic infection resolution by improving the response of virus specific CD8+T cells and sustaining cytotoxtion of virus specific CD8+T cells. Our previous study suggested that the IL-21 level in HCV chronic infection patients is lower than the level in HCV acute infection patients and IL-21 is related to the markers of HCV-specific CD8+T cell exhaustion. Therefore, the relationship between the change of IL-21 in HCV infection patients and HCV-specific CD8+T cell exhaustion will be investigated in acute and chronic HCV infected subjects in this study. The mechanism of IL-21 infulence the exhaustion of HCV-specific CD8+T cell will be investigated in the cell model and HCV transgene mice. The result of this study may provid more evidence to understand mechanism of HCV chronic infection from the exhaustion of HCV-specific CD8+T cells.

HCV特异性CD8+T细胞在控制和清除HCV病毒中起重要作用。HCV特异性CD8+T细胞功能衰竭是导致机体清除HCV病毒失败而形成慢性感染的重要原因之一。近年对IL-21的多功能及多效应的研究发现：在病毒慢性感染中，IL-21可以通过增强病毒特异性CD8+T细胞的应答并维持其细胞杀伤功能来清除病毒而控制病毒感染的慢性化。我们前期研究发现HCV慢性感染者IL-21的水平较急性感染者低，而且与HCV特异性CD8+T细胞功能衰竭表面标记相关。因此，本课题以HCV的急、慢性感染者为研究对象，研究IL-21在HCV感染者体内的变化与HCV特异性CD8+T细胞功能衰竭的关系。以细胞和转基因小鼠模型分析IL-21表达水平的变化对HCV特异性CD8+T细胞功能衰竭的影响机制。这将为从HCV特异性CD8+T细胞功能衰竭而至机体病毒清除失败来阐明HCV感染的慢性化机制提供实验依据和理论参考。

HCV特异性CD8+T细胞在控制和清除HCV病毒中起重要作用。HCV特异性CD8+T细胞功能衰竭是导致机体清除HCV病毒失败而形成慢性感染的重要原因之一。近年对IL-21的多功能及多效应的研究发现：在病毒慢性感染中，IL-21可以通过增强病毒特异性CD8+T细胞的应答并维持其细胞杀伤功能来清除病毒而控制病毒感染的慢性化。HCV慢性感染者IL-21的水平较急性感染者低，而且与HCV特异性CD8+T细胞功能衰竭表有关。为了进一步明确IL-21在HCV特异性CD8+T细胞中的作用。我们进行了以下实验：.1）完成对20例急性HCV感染者、40例慢性HCV感染者和20例健康对照的招募与筛选以及病毒学和免疫学状态评价。检测了HCV感染者血清HCV抗体水平和HCV病毒载量。对所有研究对象进行HLA分型。检测了IL-21的水平，和血液中CD4+T细胞和CD8+T细胞的绝对数量，对HCV感染者及机体细胞免疫水平进行了评价。.2）研究了未干预机体IL-21水平时HCV特异性T细胞功能衰竭的情况。流式细胞术检测病毒特异性CD8+T细胞功能衰竭的表面标记PD-1和细胞内细胞因子染色（intracellular cytokine staining, ICS）来检测细胞因子（IFN-γ）的分泌来评价HCV慢性感染时，HCV特异性T细胞功能衰竭情况。.3）研究了增强或抑制IL-21水平对HCV特异性CD8+T细胞功能衰竭的影响。.通过以上研究我们发现：.1）研究发现CD4+T细胞、CD8+T细胞数目在HCV急性、慢性感染及健康对照组中的无明显差别。.2）对HCV急性感染者和慢性感染者外周血中CD4+IL-21+T细胞和CD8+IFN-γ+T细胞数目进行了研究发现HCV特异性的CD4+IL-21+T细胞和CD8+IFN-γ+T可能与HCV感染后慢性化有关。.3）用流式细胞仪检测HCV特异性T细胞功能衰竭的细胞表面标识PD1。检测慢性HCV感染者、急性HCV感染者及健康对照者外周血中HCV特异性CD8+T细胞表面PD1分子表达百分比，结果提示：HCV特异性T细胞功能衰竭的比例在急性、慢性HCV感染者及健康对照者中有明显差别。.4）研究了IL-21在HCV特异性CD8+T细胞功能衰竭中的作用，结果提示：HCV感染者外周血中IL-21水平，以及外周血中IL-21+CD4+T细胞参与了HCV特异性CD8+