Metformin对保护性自噬所致的AZD9291耐药的抑制作用及机制研究

AZD9291, a high selectivity third-generation epidermal growth factor receptor(EGFR) tyrosine kinase inhibitor(TKI) with activities against both EGFR sensitizing resistance and T790M resistance mutation, is also facing resistance.Research shows that protective autophagy causes resistance to TKI. In our previous research, we found that the glycolytic enzyme HK2 can promote autophagy by regulating the glycolysis resulting in AZD9291 resistance.The classic antidiabetic medications Metformin can inhibit autophagy.We speculate it is diminished by inhibiting HK2 combined with mTORC1, and reverses AZD9291 resistance.This study intends to explore the mechanism in order to provide combination scheme to delay AZD9291 resistance.

AZD9291是对EGFR敏感突变和T790M耐药突变均有明显疗效的高选择性三代EGFR-TKI，但同样面临耐药窘境。研究表明，保护性自噬会导致TKI耐药。我们前期研究发现，糖酵解酶HK2能通过调控糖酵解促进自噬从而导致AZD9291耐药。经典降糖药Metformin可抑制自噬。我们推测，其机制是通过抑制HK2与mTORC1结合减弱自噬，并逆转AZD9291耐药。本研究拟探讨Metformin抑制HK2与mTORC1结合的机制及对自噬的影响在逆转AZD9291耐药中的作用。以期提供延缓AZD9291耐药的联合用药方案。

AZD9291 也面临耐药的窘境，克服AZD9291 耐药是肺癌治疗亟待解决的问题。因此，探讨AZD9291的耐药机制及其逆转策略将使AZD9291拥有更大的临床应用前景，前期实验发现在耐药细胞株中自噬和糖酵解均升高，Metformin 作为经典的降糖药，其对糖酵解关键限速酶HK2 有抑制作用，结合国内外报道提出“Metformin 可能通过抑制HK2 与mTORC1 的结合所致自噬进而逆转AZD9291的耐药” 。本研究首次发现，在体外构建AZD9291耐药细胞自噬增强，在临床患者AZD9291耐药样本中耐药后自噬增强，药物抑制自噬可显著克服AZD9291耐药，而Metformin能减弱自噬，进一步研究发现Metformin是通过产生代谢性乳酸抑制奥希替尼诱导的自噬，Metformin产生代谢性乳酸的酸性是抑制奥希替尼诱导的自噬的关键。我们的研究结果虽与国内外大多数研究结论相悖，但从现象上解释了Metformin减弱自噬的根本原因，为理清Metformin与自噬的关系从代谢层面提供了思路。