不同激活方式对受精失败的人类胚胎早期发育的影响机制

The most used interference for ICSI total fertilization failure (ICSI-TFF) is artificial oocyte activation (AOA), containing two kinds of AOA according to the time of activation, early AOA (E-AOA) and late AOA (L-AOA). Although clinical pregnancy and neonate were achieved, there still lack the data about the AOA mechanism and impacts on early development of human embryos. Our previous research shows that there was no decline of the activation efficiency in L-AOA embryos, but the implantation rate was not satisfactory. So it is urgently to know whether the development potential is same between the L-AOA and E-AOA. This program is designed to research the impacts of AOA on the early development of human pre-implantation embryos in different stages, through fluorescence immunochemistry, whole genome SNP-array etc.

卵子人工激活（AOA）是目前解决单精子注射受精失败（ICSI-TFF）常用的方法，根据激活的时间可分为早激活和晚激活，临床经验中早激活胚胎的植入率明显高于晚激活，可能原因是由于随着卵子的老化Mad2基因表达下降，导致纺锤体稳定性下降，卵子发育潜力受到影响，但目前没有相关研究证明这一推论。本研究计划检测受精失败的卵子在早激活和晚激活时Mad2的表达水平，然后利用RNAi技术调控卵母细胞Mad2基因的表达水平，观察该基因表达与激活胚胎质量的关系。胚胎质量评估通过time-lapse技术观察两种激活时间对胚胎发育时程的影响， 检测基因组激活标志基因Fibrillarin和囊胚期标志基因Cdx2，Oct-4的表达，全基因组SNP-array技术检测囊胚染色体异常率等方法来研究Mad2表达水平是否是决定两种激活胚发育潜能的关键因素。本研究将初步解释在不同时间进行卵子激活对人早期胚胎发育的影响机制。

本研究主要对卵母细胞人工激活技术（AOA）对人类早期胚胎的发育的影响机制进行研究，分为两个部分：一，临床随机对照研究，对受精失败高危型患者的卵母细胞进行随机分组，一组进行ICSI+AOA,一组仅进行常规ICSI,观察AOA对此类患者的治疗结局。并对受精失败进行分类，按照完全受精失败，低受精率和严重精子畸形分为三组，观察AOA对三组患者的治疗效果。结果发现，与常规ICSI组相比，AOA对不同ICSI受精失败类型的人群的激活效果不同，对于有完全受精失败史和严重畸形精子症的患者治疗效果较为明显，可以明显改善其受精率，但对囊胚形成率无明显影响。而对有低受精史的患者人群的治疗结局，受精率虽然有一定的改善而无统计学差异，但能明显提高其囊胚形成率。