miR-133调控EGFR/MAPK通路在骨癌痛吗啡耐受中的作用及机制研究

Bone cancer pain is one of the most difficult pain states to treat in advanced or metastatic cancer patients, which has a high incidence of 64%. Long-term and repeated use of morphine will lead to drug tolerance, and its mechanism has not been fully elucidated. Our early studies found that the expression of miR-133 was low in the spinal cord of morphine-tolerant rats, while the expression of EGFR and p-EGFR was high, the EGFR/ERK/MAPK pathway was abnormally activated, microglia were activated, and the use of EGFR monoclonal antibody could inhibit the production of morphine tolerance. We speculate that miR-133 may play a key role in the development of morphine tolerance by regulating EGFR-related pathways. The purpose of this study is to explore the molecular mechanism of the interaction between miR-133, EGFR and microglia activation in the process of pain conduction in rats with bone cancer pain-morphine tolerance, so as to find new therapeutic targets for morphine tolerance, which has important theoretical and clinical value.

骨癌痛在晚期癌症或转移癌患者中的发病率高达64%，是最难治疗的疼痛状态之一。长期反复使用吗啡会产生药物耐受，其机制尚未完全阐明，是亟待解决的重要科研问题。本课题组前期预实验发现吗啡耐受大鼠脊髓内miR-133低表达，同时EGFR和p-EGFR高表达，EGFR/ERK/MAPK通路异常活化，小胶质细胞激活，使用EGFR单抗能够抑制吗啡耐受的产生。我们推测miR-133可通过调控EGFR相关通路在吗啡耐受发生发展过程中起关键作用。本研究拟借助大鼠骨癌痛-吗啡耐受动物模型，探讨在痛觉神经系统传导过程中miR-133、EGFR与小胶质细胞活化之间相互作用的分子机制，为吗啡耐受寻找新的治疗靶点，具有重要的理论和临床实用价值。

骨癌痛是最难治疗的疼痛状态之一，长期反复使用吗啡容易产生药物耐受，其机制未完全阐明。本项目研究了在吗啡持续给药过程中EGFR及其下游通路的表达变化，以及microRNA-133b通过调控EGFR表达对小胶质细胞的激活和吗啡耐受的影响。体内研究结果发现吗啡的持续给药能够激活骨癌痛大鼠脊髓中的EGFR/ERK通路，抑制EGFR的表达能够降低小胶质细胞的活性，提高吗啡对骨癌痛大鼠的镇痛效果。体外研究发现吗啡可以时间和浓度依赖性的激活BV-2小胶质细胞，并诱导BV-2细胞中EGFR和p-EGFR的表达量增高，EGFR抑制剂AG1478能够阻断吗啡诱导的小胶质细胞激活，降低小胶质细胞的迁移能力和促炎因子的分泌，该机制可能同EGFR和TLR4之间的相互作用相关。另外我们通过荧光素酶报告基因分析验证EGFR是microRNA-133b的靶基因，microRNA-133b的过表达能够明显提高吗啡的镇痛效果，同时降低脊髓小胶质细胞活性以及EGFR、TRPV1、TLR4和P2XR7等蛋白的表达。基于以上研究结果，我们推测microRNA-133b能够通过调控EGFR的表达，影响小胶质细胞的活性和干扰疼痛相关通路中的关键因子，从而在吗啡耐受过程中发挥调控作用。本研究为提高临床吗啡镇痛效果提供了新的靶点和治疗思路，具有很好的临床应用价值和前景，并为后续进一步深入研究EGFR通路在疼痛中的作用奠定了坚实的工作基础。