小胶质细胞中TAM受体调控TLR信号通路在急性一氧化碳中毒迟发型脑病中的作用及机制研究

DEACMP is the most common and serious complication in CO poisoning with unclear pathogenesis. Our earlier research discovered that: ① immune inflammation mechanism plays important role in the pathogenesis of DEACMP; ② microglial cell mediate the generation and development of DEACMP. Microglial cell is sensitive to ischemia and hypoxia. There is still no domestic and overseas report about how the.activated microglial cell mediates DEACMP pathogenesis process, or the specific mechanism of microglial cell activation. It recently reported that, TAM receptor could regulate and control multiple functions of microglial cell; TLR signal path played important role in releasing inflammatory factors after the activation of microglial cell. Therefore, we plan to adopt DEACMP rat as animal model and apply ethology as well as molecular biology and immunohistochemistry methods are utilized to research the function as well as mechanism of regulating and controlling TLR signal path by TAM receptor in microglial cell on DEACMP, which is hoped to further verify the pathogenesis of DEACMP so as to provide theoretical reference for clinicians’ earlier treatment of DEACMP.

急性一氧化碳中毒迟发型脑病(DEACMP)是CO中毒中最常见且严重的并发症，目前其发病机制尚未阐明。我们的前期研究发现：①免疫炎症机制在DACMP的发病机制中发挥着重要作用；②小胶质细胞介导了DEACMP的发生发展。小胶质细胞对缺血缺氧很敏感。活化的小胶质细胞是如何介导了DEACMP的发病过程，以及调控小胶质细胞活化的具体机制，国内外尚未见研究报道。Nature新近报道TAM受体可以调控小胶质细胞的多种功能，TLR信号通路在小胶质细胞活化后释放炎症因子中起着很重要的作用。因此，我们拟采用DEACMP鼠作为动物模型，运用行为学、分子生物学和免疫组织化学等方法研究小胶质细胞中TAM受体调控TLR信号通路在DEACMP中的作用及机制。以期进一步阐明DEACMP的发病机制，从而为临床医师对DEACMP早期诊疗提供理论依据。

急性一氧化碳中毒迟发性脑病（DEACMP）是 CO 中毒后最常见且严重的并发症，目前其发病机制尚未阐明。在本课题组前期研究基础上，本研究采用DEACMP小鼠作为动物模型，运用行为学、分子生物学和免疫组织化学等方法探究小胶质细胞中TAM受体调控TLR信号通路在DEACMP中的作用及机制。本研究筛选合格的小鼠采用静态吸入CO法建立DEACMP动物模型，通过观察到小鼠出现典型CO中毒表现，结合碳氧血红蛋白浓度检测、Morris水迷宫检测小鼠认知功能障碍、病理结果观察海马组织有细胞损伤结果判定DEACMP模型制备成功。研究结果发现：与对照组相比，DEACMP模型组小鼠海马组织内TAM受体中Axl和Mer表达含量明显增多（P＜0.05）， Iba1、TLR4及Iba1 与 TLR4 受体共表达细胞计数增多（P<0.05），中毒后7、14天时海马组织内TLR4基因表达升高（P＜0.05），中毒后7天时海马组织内MYD88、IL-6、IL-1β、TNF-α基因表达升高（P＜0.05）；中毒后7、14、21天海马组织内TLR2、TLR4、MYD88及IL-6、IL-1β、TNF-α蛋白表达明显增多（P＜0.05）；与野生型DEACMP小鼠相比，TAM受体基因敲除小鼠（AM-/-）在CO中毒后14天TLR4、MYD88及IL-6、IL-1β、TNF-α基因表达量较高（P＜0.05），在CO中毒后7、14、21天TLR4、MYD88及IL-6、IL-1β、TNF-α蛋白表达量增多（P＜0.05），在CO中毒后14天TLR2蛋白表达量增多（P＜0.05）。结果提示TLR信号通路参与了DEACMP的发生发展，在DEACMP发病过程中，TAM受体可能通过影响TLR信号通路的表达来影响认知功能。