汉族人PPARγ基因多态性与脓毒症易感性和临床转归的相关性研究

Sepsis is the leading cause of death in critically ill patients. Mounting evidence on epidemiological investigations indicated that genetic factors may play a pivotal role in the pathogenesis of infection. Peroxisome proliferator activated receptorγ (PPARγ) as a ligand-binding nuclear receptor plays a prominent role in regulating the inflammatory response. Previous studies have reported that PPARγ gene polymorphisms are associated with a variety of inflammatory diseases, but the association with sepsis is still uncertain. In our preliminary study, genetic polymorphisms of PPARγ gene were associated with both susceptibility and outcome of sepsis. We therefore aim to carry out a case-control study in a large eastern Chinese Han population to assess the association of common single nucleotide polymorphisms (SNPs) of PPARγ gene with risk and outcome of sepsis by using modified ligase detection reaction technique and multiple regression statistical method. In addition, we will explore the roles of these SNPs on transcriptional regulation. Our results could be used to screen high-risk groups and susceptible individuals for sepsis .And they have practical values for early diagnosis, treatment of sepsis and prediction of disease development.

脓毒症是感染导致危重患者死亡的首要原因。遗传因素是影响人体对感染易感性和预后的重要因素之一。过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）是调控炎性细胞因子生成的核转录因子，PPARγ遗传多态性与多种炎性疾病相关，但与脓毒症的相关性尚不明确。我们前期的研究发现PPARγ基因多态性与脓毒症易感性和预后均相关。本课题拟在前期研究的基础上，采用病例-对照研究设计，应用改良连接酶检测反应技术和多元回归统计方法，在大样本中国华东汉族人群中进一步分析PPARγ基因上常见单核苷酸多态性（SNPs）与脓毒症易感性和临床转归的相关性，探讨功能性SNPs对该基因转录调控的作用，以期发现特异性强、敏感性高的SNPs位点，对明确脓毒症高危人群、早期诊断和治疗、预测疾病发展进程具有重要意义和实用价值。

脓毒症（sepsis）是机体对感染的反应失调导致危及生命的器官功能障碍，目前仍是危重患者死亡的首要原因。脓毒症发病机制目前尚未阐明，遗传因素在脓毒症的发生及多样化的临床转归中起着重要作用。过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）属于核受体超家族成员，具有重要的炎症和免疫反应调节作用。PPARγ遗传多态性与多种炎性疾病相关，但与脓毒症的相关性尚不明确。本研究采用病例对照的研究设计，根据sepsis 3.0诊断标准，纳入脓毒症患者553例，同时纳入健康对照513例，应用改良的连接酶检测反应技术（imLDR），对PPARγ基因上常见的13个单核苷酸多态性（SNP）位点进行基因分型。利用Haploview和Phase软件进行连锁不平衡（LD）构图和单倍型（haplotype）推断。非条件Logistic回归分析，校正混杂因素后，在不同遗传模式下，观察不同基因型和单倍型与脓毒症发病风险和临床转归的相关性。病例组中随机抽取200例，采用ELISA方法对血浆炎性细胞因子水平进行检测，线性回归方法对基因型与细胞因子水平进行关联分析。结果rs3856806 AA基因型与死亡风险增加相关，且AA型有较高的IL-6水平；rs4135275 GG和G等位基因型具有较高的死亡风险，且有增加重度器官功能障碍风险的趋势；rs10865710 CG与死亡风险降低有关，GG型具有较高的降钙素原水平和较低的IL-10水平；rs709156 AA与住院30天死亡风险增加有关，且有增加脓毒性休克发生的趋势；rs17817276 GG具有较高的30天死亡风险。单倍型AGA（rs4135275,rs709156,rs709158）较GGA死亡风险降低；AGG较GGA休克风险增加；AAG较GGA有增加住院30天死亡风险的的趋势；TAT（rs2972164,rs4684846,rs17036188）较CAT重度器官功能障碍风险较低。甲基化测序目前正在进行中，已完成片段数评估、样本DNA质控和引物设计，后续将分析甲基化水平与脓毒症不同临床转归及细胞因子水平的相关性。本研究发现PPARγ基因多态性与脓毒症临床转归相关，为进一步阐明脓毒症的发病机制、早期识别危重患者、给予及时的个体化治疗策略、提高脓毒症的救治效果提供参考。