荷人卵巢上皮癌裸鼠冻融卵巢组织移植的安全性研究

以原位移植人卵巢上皮癌的裸鼠为对象，模拟卵巢上皮癌术后冻融卵巢移植的临床过程，取不同病变程度下的常规病理检查正常的裸鼠冻融卵巢组织行皮下及原位移植，分析影响移植组织癌变及效果的因素，探讨其安全性、可行性及最佳适应证; 同时采用免疫组化法、流式细胞术及 RT-PCR分别检测移植前后卵巢组织的CK-7、CA125、P53、survivin、MMP-2/TIMP-2等分子指标的表达水平，分析这些分子指标移植前后表达量的改变及与移植后组织癌变的关系，探讨其筛查微小残留癌细胞及隐匿转移的价值，筛选最佳检测手段及方案，综合评估建立相对安全的筛选移植卵巢组织的标准，为进一步的临床应用提供依据。

本研究以原位移植人卵巢上皮癌的裸鼠为对象，采用免疫组化法、RT-PCR及流式细胞术检测癌旁正常卵巢组织的CK-7、CA125、P53、survivin、MMP-2、TIMP-2等分子指标的表达，以不同的检测方法及检测指标进行组合作为标准筛查出来的癌旁正常卵巢组织进行冻融原位移植，分析各组移植后的癌变率、隐匿癌变率、血清CA125水平，同时分析了玻璃化冷冻前后以及移植前后卵巢组织中卵泡形态及激素分泌功能。结果显示：癌组织的以上分子指标检测均为阳性，裸鼠正常卵巢组织均为阴性；分子指标的表达向无癌方向呈一递减趋势；三种检测方法全部指标表达阴性或主要指标CK-7、CA125及survivin表达阴性，移植后组织未发现癌变，其隐匿癌变率及血清CA125水平亦低于主要指标CK-7、CA125及survivin表达阳性组；皮下及原位卵巢组织移植后的癌变率及隐匿癌变率没有差异。玻璃化冷冻前后卵巢组织中卵泡形态及各级卵泡的比例没有差异，冷冻组织以初级卵泡及次级卵泡等窦前卵泡为主； 移植后组织内卵泡以次级卵泡及窦状卵泡为主；癌旁组织移植后卵巢内分泌功能指标如FSH和E2 明显恢复，但尚未达到正常水平；皮下移植组和原位移植组的卵泡刺激素水平和雌二醇水平无明显差异。上述结果提示以上分子指标全部阴性或主要指标CK-7、CA125、survivin阴性均可作为筛选癌旁残余正常卵巢组织的标准。和其他方法相比，免疫组化法有一定优势，如需要组织更少，临床使用普遍。癌旁卵巢组织冻融移植后有正常卵泡发育及激素分泌功能；皮下移植和原位移植均可取得较好的效果；癌旁卵巢组织冻融移植可作为卵巢上皮癌患者治疗后恢复卵巢内分泌功能的有效手段；人卵巢上皮癌裸鼠冻融卵巢组织移植安全可行。