新型Th1型分子佐剂HSP70L1的抗原提呈及与免疫细胞作用机制研究

通过对人树突状细胞（DC）的大规模测序，从DC的cDNA文库中获得一种新型的人HSP70家族的新分子HSP70L1（GenBank登录号为AF143723），初步研究表明该分子具有很强的Th1型佐剂样作用，但是具体的作用机制包括抗原提呈途径、交叉提呈通路及与免疫细胞作用的机制不明。本课题通过构建表达HSP70L1与PreS2/S的融合蛋白，研究HSP70L1通过DC对人Na?ve T细胞的直接和交叉抗原提呈通路，与NK细胞的作用以及在NK细胞与DC的相互作用中的影响，观察HSP70L1对Treg的作用以及其对Treg抑制DC抗原提呈功能的逆转，研究B细胞在HSP70L1的抗原提呈中作用和抗原提呈途径，并利用HBV转基因小鼠模型研究HSP70L1佐剂的免疫学效应、抗原提呈以及NK细胞、Treg细胞对其免疫学效应的影响。为将来开发具有自主知识产权的新型免疫分子佐剂奠定理论基础。

系统地研究了HSP70L1作为免疫佐剂，在蛋白疫苗免疫中的作用。构建了HSP70L1与HBV抗原PreS2/S的融合蛋白，该融合蛋白能够通过TLR4受体同MoDC结合内吞，并通过Vacuolar途径交叉提呈给CD8+T细胞,其作用可以被氯喹所抑制，诱导产生抗原特异性的CD8+T细胞增殖和分泌IFN-γ，其作用在健康人和慢性乙肝患者来源的外周血以及正常小鼠中都得到验证。另外，PreS2/S-HSP70L1蛋白疫苗可以打破HBV转基因小鼠的免疫耐受，降低血中HBsAg的滴度和肝组织中HBV mRNA的含量。HSP70L1可以刺激NK细胞分泌IL-6，并且在IL2亚剂量活化状态下，刺激NK细胞分泌IFN-γ，其作用是通过NK细胞上CD16受体起作用，NK细胞在HSP70L1诱导的细胞免疫应答中起到辅助增强作用，剔除NK细胞显著减弱HSP70L1的佐剂样作用。HSP70L1对B细胞的抗原提呈也有一定促进作用。通过以上研究，明确了HSP70L1的交叉提呈功能，对NK和B细胞的活化功能，发现了HSP70L1新的作用受体CD16，对于更好的开发HSP70L1的佐剂样作用奠定了基础。