利用特异性单抗研究天花粉蛋白有效活性基团

本研究在扩大制备系列抗天花粉蛋白单抗，并对其作进一步鉴定和纯化的基础上，通过建立从细胞水平和亚细胞水平稳定检测天花粉上有效生物活性基团的方法以及天花粉上抗原决定簇的分析方法，用特异性单抗为探针，分析了天花粉上有效生物活性基团的数目及所座落的片段。研究结果表明，天花粉蛋白羟胺裂解片段HATf1对蛋白质合成的抑制作用与完整天花粉相似，提示天花粉的活性中心位于大片段部分。单抗封闭实验表明，第14号单抗具有封闭HATf1的蛋白质合成抑制作用。由于HATf1仍保留与天花粉相似强度的蛋白质合成抑制作用，分子量为完整天芬粉的4/5，目对人补体C3的激活作用也较ICS低，故可初步确认HATf1是一种高效、低毒的天花粉蛋白裂解片段。