鹿结核病流行株与卡介苗差异基因的筛选、表达及表达产物的反应原性研究

流行病学调查表明，目前结核病已经成为危害我国养鹿业最为严重的传染病。研究表明，BCG是预防鹿结核病的有效制剂。然而，随着BCG在鹿群中的应用，产生了一个严重的问题-"用现行的诊断方法根本无法区分出BCG免疫鹿与野毒感染鹿"，这是"长期困扰养鹿业的一大难题"，该问题的出现，严重地干扰了鹿结核病的诊断和防制，限制了BCG在鹿群中的应用，致使鹿结核病的流行日趋严重。为此，课题组在完成鹿结核病原分离与鉴定的基础上，拟联合应用Spoligotyping和MIRU进行基因分型，确定流行菌株；联合应用SSH和基因芯片技术，筛选鹿结核病流行株与BCG的差异基因并进行原核表达，应用Western blotting和ELISA验证差异基因表达产物的反应原性。这将为建立起一种诊断方法来破解"无法区分出BCG免疫鹿与野毒感染鹿"这一长期困扰养鹿业的大难题做出有益的探索和尝试，将对控制和扑灭鹿结核病产生深远的影响。

流行病学调查表明，目前结核病已经成为危害我国养鹿业最为严重的传染病。研究表明，BCG是预防鹿结核病的有效制剂。然而，随着BCG在鹿群中的应用，产生了一个严重的问题“用现行的诊断方法根本无法区分出BCG免疫鹿与野毒感染鹿”，这是“长期困扰养鹿业的一大难题”，该问题的出现，严重地干扰了鹿结核病的诊断和防制，限制了BCG在鹿群中的应用，致使鹿结核病的流行日趋严重。为此，本课题组在完成鹿结核病病原分离与鉴定的基础上，通过联合应用分枝杆菌散在重复单位（MIRU）分型技术和间隔区寡核苷酸（Spoligotyping）分型技术进行基因分型，确定了流行菌株；通过SSH和反向Southern blot筛选出鹿结核病流行株与卡介苗(BCG)的差异基因60个，并选择其中5个单基因及2个融合基因进行了原核表达，应用Western blot和ELISA验证了差异基因表达产物具有较好的反应原性。该结果为建立起一种诊断方法来破解“无法区分出BCG免疫鹿与野毒感染鹿”这一长期困扰养鹿业的大难题做出有益了探索和尝试，将对控制和扑灭鹿结核病产生深远的影响。