新基因Gsdma3抑制静息毛囊干细胞提前活化的实验研究

静息毛囊干细胞的提前活化将引发毛囊周期性再生障碍、皮肤新生物形成等异常。发现抑制静息毛囊干细胞提前活化的关键因子，阐明其作用机制，具有重要意义。我们前期研究发现：新基因Gsdma3突变后，静息毛囊干细胞的标记物表达减弱、增殖加快，同时，Wnt通路活性升高，其抑制基因Frzb表达降低。据此，本课题拟在确定Gsdma3表达与Wnt通路活性下调、毛囊干细胞提前活化抑制之间的相关性基础上，从动物整体、细胞及分子三个水平，研究Gsdma3对Wnt信号通路引发的，毛囊干细胞提前活化的直接抑制作用。随后，进一步分析Gsdma3调节Frzb表达的机制，阐明Gsdma3阻止Wnt通路激活、进而抑制毛囊干细胞提前活化的分子机理。本课题有助于发现抑制静息毛囊干细胞提前活化的新调节因子，增强对新基因Gsdm3在相关疾病发生中作用及机制的认识，促进以Gsdm3为新靶点治疗临床上相关疾病新思路的形成。

静息毛囊干细胞的提前活化将引发毛囊周期性再生障碍、皮肤新生物形成等异常。发现抑制静息毛囊干细胞提前活化的关键因子，阐明其作用机制，具有重要意义。.本项目中我们首先研究了Gsdma3基因突变及突变回补时，Wnt通路活性及毛囊干细胞增殖的活性变化的情况，发现Gsdma3基因突变引发了Wnt通路的激活，并导致毛囊干细胞增殖活性的增加。.在此基础上，我们又对在体及离体的毛囊细胞实施Gsdma3的过表达，发现能Gsdma3能直接抑制内源性及外源性Wnt通路的活性，并导致毛囊干细胞增殖活性减弱。.最后我们对Gsdma3基因上述作用的分子机制进行了探讨。利用荧光素酶报告基因实验及ChIP实验，我们发现Gsdma3基因不能直接通过转录水平调节Wnt分子的表达，影响Wnt通路的活性。.而通过分析Gsdma3基因与Wnt通路受体Frz的关系，我们证实Gsdma3基因突变可引发Frzb4基因表达上调，且Gsdma3基因能抑制离体培养的皮肤上皮细胞Frzb4的蛋白及mRNA的表达，提示下调Frzb4表达的可能是Gsdma3基因抑制Wnt通路活性的机制之一。.此外，还发现对Wnt通路活性有调节作用的维甲酸信号通路相关分子的表达也受Gsdma3基因的影响，表明Gsdma3基因也可能通过维甲酸信号通路对Wnt通路活性产生影响。