鞘氨醇激酶信号促进淋巴管生成的作用及机制研究

淋巴管生成是与淋巴系统发育、肿瘤转移密切相关的重要病理生理过程。SPK1-S1P是机体重要的鞘磷脂代谢分子，目前已经证明了SPK1-S1P信号是众多促血管生长因子的信号转导分子，但其是否具有淋巴管生成的调节作用并不清楚。本研究将根据淋巴管内皮细胞（LEC）特有的标记物，利用流式分选细胞仪FACSAria 分选淋巴管内皮细胞（LEC）；检测LEC细胞SPK1和S1P受体的表达情况；研究SPK1-S1P信号与VEGF-C、D信号途径的相关性；观察S1P对LEC细胞VEGFR-3表达的影响。以腺病毒为载体将外源SPK1或SPK1siRNA导入LEC细胞,探讨高表达SPK1或抑制SPK1对LEC细胞增殖、迁移、淋巴管形成的影响。利用小鼠耳部皮肤淋巴管生成实验，确定SPK1在体内对淋巴管生成的调节作用。预期结果将确定SPK1-S1P信号对淋巴管生成的调节作用及机制，为肿瘤等疾病治疗提供新的靶点。

淋巴管生成是与淋巴系统发育、肿瘤转移密切相关的重要病理生理过程。SPK1-S1P是机体重要的鞘磷脂代谢分子，本研究证明了SPK1-S1P信号促进淋巴管生成的作用及相关机制。根据淋巴管内皮细胞（LEC）特有的标记物，利用流式分选细胞仪FACSAria 分选淋巴管内皮细胞（LEC）；检测LEC细胞SPK1和S1P受体的表达情况，结果表明：淋巴管内皮细胞表达SPK1以及S1P受体EDG1、EDG3、EDG5，提示SPK1-S1P信号可能对淋巴管内皮细胞具有调节作用。研究SPK1-S1P信号与VEGF-C、D信号途径的相关性；S1P促进淋巴管内皮细胞迁移，S1P通过S1P1和S1P2受体激活MAPK信号通路。以腺病毒为载体将外源SPK1或SPK1siRNA导入LEC细胞，探讨高表达SPK1或抑制SPK1对LEC细胞增殖、迁移、淋巴管形成的影响。我们的研究结果显示：高表达SPK1促进淋巴管内皮细胞增殖、迁移、淋巴管形成；干涉SPK1抑制淋巴管内皮细胞增殖、迁移、淋巴管形成。即SPK1活性是淋巴管内皮细胞侵袭和淋巴管生成所需的。利用小鼠耳部皮肤淋巴管生成实验，确定了SPK1在体内对淋巴管生成的调节作用。研究结果确定SPK1-S1P信号对淋巴管生成的调节作用及机制，并且也证明了S1P主要通过与S1P2受体结合促进血管平滑肌细胞的迁移，为肿瘤等疾病治疗提供了新的靶点。