枣疯病类菌原体异戊烯基转移酶基因的分离与结构分析

联机检索Ti质粒激素合成相关基因；据其同源序列设计异戊烯基转移酶（ipt）基因探针引物，通过PCR从Ti质粒获取ipt探针。提取采集的病健枣树和泡桐总DNA，选择该类基因内无酶切位点的酶限制对其进行酶切，产物与所获探针进行了Southern非严格性杂交，探索了两者杂交的条件，同时也将酶切总DNA克隆，用获取的探针进行点杂交，经过几轮筛选，结果不稳定。设计PCR方案，用设计的异戊烯基转移酶引物对总DNA进行PCR扩增，经过条件的优化和改进模板植物总DNA提取方法，在泡桐病样中扩增出预期大小的片段，在对照健样泡桐中未见此带，确证为类菌原体ipt基因，证实了此基因表达引起了患病植株的丛枝症状，为类菌原体病害的防治提供了重要依据。