富硒乳酸菌拮抗黄曲霉毒素对肉仔鸡毒性作用的效果及分子机理研究

黄曲霉毒素是毒性极强的霉菌毒素，其危害性大，存在范围广，目前已成为影响农业和饲料工业健康发展的严重障碍；因此，探寻高效、安全、无污染的祛除黄曲霉毒素的脱毒剂已成为当前研究的热点。研究发现，多种乳酸菌具有抑制霉菌生长或吸附黄曲霉毒素的作用；多种乳酸菌还具有将培养基中的无机硒转化为菌体内的有机硒的能力，而有机硒也可拮抗黄曲霉毒素在体内的毒性作用；此外，部分乳酸菌还具有益生菌的相关作用。然而，至今未见将有机硒和乳酸菌联合应用来拮抗黄曲霉毒素毒性的研究报道。因此，本项目主要是在研究培育同时具有脱毒剂、益生菌和有机硒三重作用的富硒乳酸菌的基础上，探索其在体内外拮抗黄曲霉毒素对肉仔鸡毒性的作用效果，并从黄曲霉毒素代谢酶基因mRNA表达方面探索其分子调控机理，为富硒乳酸菌的未来应用提供科学依据。

本研究根据资助项目计划书预定的方案开展研究，已圆满完成所有试验内容。.首先，本研究筛选出了对黄曲霉毒素（AF）具有较强拮抗作用的乳酸菌菌株，培育了富硒乳酸菌并优化了其培养条件。.其次，本研究在模拟鸡肠道环境中研究了富硒乳酸菌对AF的吸附效果。发现富硒乳酸菌在模拟肠道环境中对黄曲霉毒素B1(AFB1)有较强的吸附能力；肠杆菌可提高富硒乳酸菌对AFB1的吸附能力，而肠球菌和胰蛋白酶会降低富硒乳酸菌对AFB1的吸附能力；在肠杆菌、肠球菌和双歧杆菌同时存在时，富硒乳酸菌对AFB1的吸附能力明显提高。.复次，本研究在鸡肝细胞培养液中添加富硒乳酸菌，培养12 h后加入AFB1，3h后测定细胞CYP450和LDH活性、抗氧化指标和GPX4、CYP1A2、CYP3A4 mRNA表达量。发现富硒乳酸菌可提高AFB1所致的CYP450、LDH、GPX、T-AOC活性及GPX4 mRNA 表达量下降，并可降低AFB1所致的MDA含量和CYP3A4 mRNA表达量升高。.再次，本研究将富硒乳酸菌添加到含0.1mg/kg AFB1的日粮中作为试验日粮，进行肉鸡饲养试验。测定生产性能、血液生化、组织AF含量、抗氧化功能、肝CYP450酶活性、肝GSTA3、GPX4、CYP1A2、CYP3A4 mRNA表达量。发现富硒乳酸菌可改善AFB1对肉鸡生产性能和血液生化指标的影响，可降低饲喂AFB1日粮肉鸡全血、肝、肾和肌肉AF残留量，可提高AFB1所致肝脏、肌肉和血液GPX、POD、T-AOC、CAT、GR、GST、SOD、GSH活性、肝CYP450酶系活性和GPX4 mRNA表达量的降低，可降低AFB1所致肝脏、肌肉和血液GR、GST、MDA含量和GSTA3、CYP3A4 mRNA表达量的升高。.最后，本研究将富硒乳酸菌添加到商品日粮中，观察其对肉鸡生产性能、肠道菌群、血液生化、组织AF残留和肉品质的影响。发现富硒乳酸菌能够提高肉鸡生产性能和肉品质、调节肠道菌群、降低肉鸡血液、肝脏、肌肉中AF含量和血清CHO、TG含量。.总之，本研究表明富硒乳酸菌在体内和体外均能有效拮抗AF对肉鸡的毒性作用，其通过增加GPX4 mRNA表达进而增加GPX活性和调节CYP3A4及GSTA3 mRNA表达进而影响AF代谢酶活性两条途径来发挥对AF毒性的拮抗作用。