基于肠道菌群-宿主代谢响应共变效应的酸甘化阴法生津止泻作用机制研究

酸甘化阴法是中医学的重要治则治法，课题组前期动物实验和临床验证发现，酸甘化阴法对于小儿腹泻气阴两虚证有较好的生津止泻疗效，但其分子作用机制还不十分清楚。肠道菌群与宿主代谢响应具有共变效应和人是"超生物体"的观点为深入揭示传统中医理论的现代科学内涵提供了新的思路，也为酸甘化阴法生津止泻效应的机理研究提供了新的切入点。本课题在前期研究基础上，借助幼龄大鼠腹泻模型，运用PCR-DGGE分子生态学、NMR代谢组学和多元统计学相结合的策略和多学科技术，研究酸甘化阴法（人参乌梅汤加味）对肠道菌群与宿主代谢响应共变效应的调控作用，以期从"肠道菌群-宿主共生关系"的角度揭示酸甘化阴法生津止泻的作用机理，为进一步揭示中医治则治法的科学内涵及中医药多层次、多靶点的复杂作用体系，促进临床疗效的提高提供理论参考和实验依据。

本项目借助幼龄大鼠腹泻模型，以酸甘化阴法的代表方人参乌梅汤加味为载体，运用PCR-DGGE分子生态学、NMR代谢组学和多元统计学相结合的技术和方法，研究酸甘化阴法对肠道菌群与宿主代谢响应共变效应的调控作用。以期通过宿主代谢响应来探讨中药复方对肠道微生态的影响，揭示酸甘化阴法生津止泻的作用机制。研究结果发现：①人参乌梅汤加味（酸甘化阴法）对气阴两虚证腹泻有良好的生津止泻效应，对改善模型大鼠腹泻症状，纠正轻中度脱水状态和结肠黏膜病理形态有较好作用。②人参乌梅汤加味（酸甘化阴法）对腹泻模型大鼠肠道微生物多样性指数、丰富度和均匀度有良好的调控作用，利于腹泻大鼠肠道微生态的恢复。含量发生明显变化的菌属主要有乳杆菌、厌氧弧菌、普氏菌和脱硫弧菌，可能是人参乌梅汤加味（酸甘化阴法）影响腹泻治疗效应的关键功能菌。③人参乌梅汤加味（酸甘化阴法）对腹泻模型大鼠尿液中的关键代谢物存在良性调节作用，其中乌头酸、肌酸酐、亮氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、柠檬酸、丙酮可能为人参乌梅汤加味（酸甘化阴法）影响腹泻的关键代谢物。④腹泻模型大鼠肠道菌群结构与宿主的尿液代谢表型间存在关联。人参乌梅汤加味（酸甘化阴法）可能通过影响肠道菌群与宿主代谢互作发挥生津止泻效应。项目研究结果为进一步揭示中医治则治法的科学内涵及中医药多层次、多靶点的复杂作用体系，为酸甘化阴法的后续研究奠定了基础。