水稻OsSLAC1的功能研究及抗逆转基因水稻植株的筛选

本项目拟对水稻OsSLAC1基因的功能进行详细的研究。对拟南芥同源基因AtSLAC1的研究表明，AtSLAC1在气孔保卫细胞中特异性表达，编码S-type阴离子通道蛋白，并在气孔关闭运动中发挥必不可少的关键作用。通过同源比对及表达分析，我们发现OsSLAC1与AtSLAC1同源性最高,达61%，且在叶片中高表达，推测OsSLAC1是水稻气孔保卫细胞质膜阴离子通道蛋白。本研究拟通过RT-PCR表达分析鉴定OsSLAC1的表达部位，通过对其启动子活性分析(GUS标记)揭示OsSLAC1的组织和时空表达特性，通过EGFP标记和异源表达研究其亚细胞定位，运用膜片钳技术研究其阴离子通道活性及其调控机制，通过转基因功能互补实验验证其是否可以互补拟南芥AtSLAC1的功能，以及通过水稻转基因的方法构建OsSLAC1过量表达及抑制表达的转基因植株，通过表型分析研究其生物学功能并筛选抗旱节水型的水稻植株。

本项目按计划完成了全部研究工作，取得了良好的实验结果。主要研究结果包括以下几个方面。第一，用real-time PCR方法检测了水稻OsSLAC1基因在水稻中的组织表达特性，结果表明OsSLAC1在成株期水稻根和茎中基本不表达，在叶片中的表达量最高；盐和干旱处理下调水稻幼苗OsSLAC1的表达量， 而ABA对其表达水平无显著影响；蛋白亚细胞定位实验结果表明，OsSLAC1定位于细胞质膜上；获得了表达OsSLAC1基因的拟南芥slac1突变体转基因植株；通过转基因方法获得了过量表达OsSLAC1的转基因水稻株系。该研究为对OsSLAC1的深入研究奠定了坚实的基础，并初步表明OsSLAC1是定位于质膜上的阴离子通道蛋白。该项目依托课题组将继续进一步的研究工作。