枳实生峻熟缓、健脾和胃的物质基础及炮制机理研究

Under the theory“bran-processed moderating medicinal and nourishing the somach”, “born whit a fierce,bran-processed slightly eased”,what is the material base for fructus aurantil imaturus by bran-processed?Why the effect of moderate medicinal and strengthen the spleen and stomach by bran-processed?We apply“processing-material base-bioconversion-pharmacokinetic-efficacy-supplementary material” as research model. . Firstly using HPLC-Q-TOF/MS, study the chemical components change of fructus aurantil imaturus by bran-processed. So as to find a definite material of fructus aurantil imaturus for moderate medicinal. To study the processing mechanism of fructus aurantil imaturus from the aspects of processing conversion.. Secondly with the theory of intestinal absorption barrier, we use the model of rat in vitro intestinal flora, review the main active ingredients of fructus aurantil imaturus bioconversion processes.Then optimization through Caco-2 and rat intestinal perfusion model, compare the intestinal absorption kinetics change of fructus aurantil imaturus on chemical composition and their transformation products.In order to explain “born whit a fierce,bran-processed slightly eased” in vivo effect of material base. . Thirdly through multiple ingredients pharmacokonetic and pharmacodynamic experiment, investigating the effect on gastrointestinal movement of raw and bran.In order to explain “bran-processed moderating medicinal and nourishing the somach” theory..Finally according to the characteristics of bran, we study the influence of bran-processed within the definite entity, so as to state the substance of fructus aurantil imaturus for bran-processed.

课题在“麸皮制去燥性而和胃”, “生用峻烈,麸炒略缓”理论指导下,研究枳实经麸炒后生峻熟缓，增强健脾和胃作用的物质基础及药理药效变化机制。采用“炮制-物质-转化-药动-药效-辅料”的综合模式展开研究。用HPLC-Q-TOF/MS技术，研究枳实麸炒前后化学成分及组分的变化差异；找到枳实“生峻熟缓“的物质变化基础，从炮制转化方面说明枳实麸炒炮制机理。以肠吸收屏障网络藕联作用学说为指导，采用大鼠离体肠道菌群模型，考察枳实中主要活性成分的炮制转化过程。接着通过Caco-2体外细胞及大鼠在体肠灌流模型，比较麸炒前后枳实化学成分及其转化产物的肠吸收动力学变化，以解释“生用峻烈,麸炒略缓”的体内效应物质基础。通过多成分药代动力学及药效学试验，从整体和离体动物实验入手，考察枳实生制品对胃肠运动影响，解释“去燥性而和胃”理论。并且针对麦麸本身性质特点，研究辅料对枳实体内代谢过程影响，系统揭示枳实麸炒炮制机理

课题旨在通过现代科学技术手段验证和揭示枳实麸炒炮制机理，项目的假说为“枳实经麸炒后化学成分发生量变和质变，使枳实生峻熟缓同时健脾和胃作用增强”。项目构建了“炮制-物质-转化-药动-药效-辅料”的综合研究模式，按照上述模式，通过炮制化学、生物转化、肠吸收代谢、药动学、药效学等实验，验证假说的科学性。.通过对枳实麸炒前后化学成分研究发现，麸炒枳实化学成分在量和质上均发生了改变。枳实麸炒品及生品相较于对方均出现三个新化合物。麸炒枳实黄酮类成分含量降低，或附以多糖类成分而存在；通过对枳实生品及麸炒品特征图谱比较发现，枳实生品及麸炒品化学成分有所不同，部分化合物含量发生变化，并且有新成分生成，证实其与枳实生峻熟缓炮制机理相关。.麸炒后麦麸吸收枳实中部分化合物，并且枳实中挥发油类组分也发生着变化，部分组分含量随着炒制过程中的挥发和麦麸的吸附而含量降低，麦麸同时能够协同增强理气健胃的作用，麦麸的变化验证枳实生峻熟缓，麸炒枳实增强健脾和胃作用的科学性。.在对枳实生品及麸炒品中代表性化合物的肠吸收代谢及生物转化研究中，验证了枳实麸炒后健脾和胃作用增强的炮制机理。在Caco-2实验中，发现枳实麸炒后提高了化合物的生物利用度。在大鼠肠灌流实验中，发现枳实制品提取物较生品在大鼠肠道吸收显著提高。一定程度上验证了枳实经麸炒后不仅能缓和药物的峻烈之性，还能提高药物在体内的吸收，进而增强健脾和胃作用。. 通过药动学实验考察，发现枳实经麸炒后，能够促进有效成分新橙皮苷吸收，延长消除时间；组织分布实验结果说明枳实主要作用部位在脾胃，这与枳实归经相符。对脾胃影响的药效学研究发现，麸炒品能更好改善脾虚大鼠症状。上述实验结果证实枳实经麸炒后健脾和胃的作用增强。. 课题通过相应实验手段，验证和解释了枳实 “麸皮制去燥性而和胃”及“生用峻烈麸炒略缓”传统理论。