从Her2-PI3K/Akt-FOXO信号通路探讨以毒攻毒法抗雌激素受体阴性乳腺癌的分子机制

Induction apoptosis of tumour cell is the key for developing a cure for cancer. Intracellular Her2-PI3K/Akt-FOXO signal transduction pathway is an important factor in the genesis and development of ER-negative breast carcinoma. Combat poison with poison is an effective treatment method for malignant tumor with a long history and definite therapeutic effect. We previously showed that Langdu-Dazao-Tang can induce breast tumor apoptosis, but the underlying molecular mechanisms remain elusive. Thus, we favor the hypothesis that estrogen receptor-negative breast cancer is an indication for Langdu-Dazao-Tang. Induction apoptosis of breast tumor through inhibiting Her2-PI3K/Akt-FOXO signaling pathway is molecular mechanisms of breast cancer treatment with Langdu-Dazao-Tang. To test this hypothesis, this project will evaluate the differences of anti-tumor activity of Langdu-Dazao-Tang between ER-negative and ER-positive breast carcinoma. We will investigate that effect of Langdu-Dazao-Tang on key signaling molecules Her2-PI3K/Akt-FOXO signal transduction pathway. The purpose of this project was to clarify molecular targets and mechanism of apoptosis of breast tumour cell induced by Langdu-Dazao-Tang. In addition, this project further enrich and innovate connotation of combat poison with poison, one of theory traditional Chinese medicine, and provide an idea for research on breast cancer therapy.

诱导肿瘤细胞凋亡是治疗癌症的关键环节之一，细胞内Her2-PI3K/Akt-FOXO信号通路在雌激素受体（ER）阴性乳腺癌的发生和发展中起着重要作用。中医“以毒攻毒”法在抗肿瘤方面应用历史悠久，临床疗效明确。我们前期研究发现，“以毒攻毒”中药狼毒大枣汤具有诱导ER阴性乳腺肿瘤细胞凋亡的作用，但其确切的分子机制仍不明确。据此，我们提出“雌激素受体α阴性乳腺癌是狼毒大枣汤的适应病症，诱导Her2-PI3K/Akt-FOXO信号通路介导的乳腺肿瘤细胞凋亡是狼毒大枣汤“以毒攻毒”治疗乳腺癌的分子基础”的假说。围绕假说，本项目拟观察狼毒大枣汤抗ER阴性和ER阳性乳腺肿瘤之间的差异，对Her2-PI3K/Akt-FOXO信号通路中关键信号分子的影响，寻找狼毒大枣汤诱导乳腺肿瘤细胞凋亡的可能分子机制和作用靶点。本项目为乳腺肿瘤治疗的探索研究提供新的思路，丰富和创新了祖国传统医学“以毒攻毒”的科学内涵。

背景：中医历来认为“邪毒”结于体内为肿瘤根本，古代医家在运用有毒中药治疗肿瘤时，常用“以毒攻毒”法在辨证的基础上辨病治疗，临床上多有效验。雌激素受体（ER）阴性乳腺癌在临床上表现为更高的侵袭性及更差的预后；我们前期研究发现：“以毒攻毒”的中药复方狼毒大枣汤具有诱导乳腺肿瘤细胞凋亡的作用。本研究目的是验证：“ER阴性乳腺癌是狼毒大枣汤的适应病症，Her2-PI3K/Akt-FOXO信号通路介导的乳腺肿瘤细胞凋亡是狼毒大枣汤“以毒攻毒”治疗乳腺癌的分子基础”的假说。. 主要研究内容：一、通过体内、外实验观察，狼毒大枣汤对ER阴性和ER阳性乳腺肿瘤干预效果的差异性。二、研究Her2-PI3K/Akt-FOXO信号通路在狼毒大枣汤诱导乳腺肿瘤细胞凋亡中的调控作用。三、狼毒大枣汤、狼毒和大枣对荷乳腺肿瘤小鼠的毒性作用差异。. 重要结果：体外细胞实验证实，狼毒大枣汤对ER阴性、ER阳性乳腺肿瘤细胞均有显著的增殖抑制及诱导凋亡作用，且对ER阴性乳腺癌细胞作用效果更强；Her2-PI3K/Akt-FOXO信号通路在狼毒大枣汤抑制乳腺肿瘤细胞增殖及诱导其凋亡中起调控作用；结合PI3K特异性抑制剂（LY294002）药理性封闭，进一步明确了PI3K/Akt通路在其中的调控作用及上下游关系。这些研究结果，在体内荷瘤裸鼠实验中也得到了证明及验证。通过比较狼毒大枣汤、狼毒和大枣分别对荷乳腺肿瘤小鼠的毒性差异发现，单独同剂量狼毒汤剂对乳腺肿瘤小鼠的肝、肾的毒副作用更强。. 科学意义：本研究证实了，狼毒大枣汤可通过诱导细胞凋亡起到抗乳腺肿瘤的作用，且对ER阴性乳腺肿瘤有更好的作用效果，配伍大枣可一定程度上降低狼毒大戟的毒副作用；这为乳腺肿瘤的治疗提供了科学的实验依据，也部分揭示“以毒攻毒”法治疗乳腺癌的科学内涵。从中医“以毒攻毒”理论的角度，探索通过诱导肿瘤细胞凋亡而治疗乳腺癌的具体含义，为分析细胞内信号转导过程与中医“以毒攻毒”理论之间的一些内在联系提供新的思路。