多硫酸寡糖抗哮喘分子作用机制的研究

为进一步研究多硫酸寡糖抗哮喘作用的免疫调节机制，以自制多硫酸寡糖为原料,用凝胶层析和离子交换层析分离不同单糖聚合度、不同硫酸基含量和不同单糖组成的寡糖，用生物大分子作用仪研究不同结构的寡糖对白介素4、5和8的结合强弱，选出三种结合强的寡糖；测定其红外光谱、核磁共振光谱和质谱，确定其分子结构。用流式细胞仪和ELISA分别测定所选出的寡糖对白介素4、5和8的分泌及活性的抑制作用；以cDNA探针测定不同结构的寡糖对Ｔ细胞白介素4、5和单核细胞白介素8 mRNA转录的影响；通过电泳迁移率实验检测寡糖调节Ｔ细胞内核转录因子NFAT与DNA结合活性，探讨调节白介素4、5和8表达的转录机制,从分子水平和基因转录上探讨寡糖免疫调节作用的机理。为研制副作用少、抗哮喘作用强的多硫酸寡糖类细胞因子调节剂，阐明它的分子作用原理奠定基础。这对于开发通过免疫调节作用治疗哮喘病的聚阴离子寡糖类药物具有重要的指导意义。