桃果实主要过敏原脂质转移蛋白品种间变异和全基因组关联分析

With dramatic increase of diverse fruits consumption in China, fruits have been recognized as the number one food allergy in clinics that affect patients' safety and quality of life. Peach is frequently reported as allergenic fruit and recently we identified the lipid transfer protein (Pru p 3) is the dominant major allergen causing severe systematic symptoms. Also significant differences in the gene expression were demonstrated between various peach cultivars, so selection of low Pru p 3 content is a positive preventive strategy to peach allergy problem. This project will isolate natural Pru p 3 protein and produce recombinant allergen by yeast expression system. Monoclone antibody will be prepared and used in measuring Pru p 3 content of 90 diverse peach culitvars. Moreover, genome wide association analysis using high denisty SNP will be performed to identify specific loci that allow breeders to select hypoallergenic cultivars.

随着我国新鲜水果消费的种类和数量大幅增加，水果已经成为我国临床上发现的主要致敏食物，桃是我国最常见的大宗过敏水果之一,影响部分人群的安全和生活质量。根据前期临床免疫学研究表明，我国95％桃过敏患者是对一种脂质转移蛋白（过敏原标准命名为Pru p 3）过敏，引发较为严重的系统性过敏反应。解决桃过敏问题的一个有效方法是鉴定选择低过敏的品种。本项目将分离纯化天然的桃果实脂质转移蛋白，进行酵母表达系统重组生产，制备单克隆抗体，应用ELISA方法对90多份桃核心种质材料进行过敏蛋白的定量分析，比较不同品种类型和起源等与过敏蛋白含量的关系，并进行全基因组SNP关联分析其遗传控制机理，开发相应的分子标记应用于选择低过敏桃品种。

随着我国新鲜水果消费的种类和数量大幅增加，水果已经成为临床上发生过敏的主要食物之一。桃过敏问题尤为突出，是我国最常见的大宗水果,影响部分人群的安全和生活质量。.根据前期临床免疫学研究表明，我国95％桃过敏患者是对一种脂质转移蛋白（LTP，过敏原标准命名为Pru p 3）过敏，引发较为严重的系统性过敏反应。其次是Pru p 1。解决桃过敏问题的一个有效方法是鉴定选择低过敏的品种。本项目旨在纯化高纯度的过敏原，用单抗检测含量，筛选低过敏品系，并分析遗传控制因子。.项目成功分离纯化天然的桃果实脂质转移蛋白，利用酵母表达重组蛋白制单克隆抗体7个，选择出2个单抗适宜夹心ELISA法检测水果蛋白提取物中致敏蛋白。检测范围在1-30ng/ml。桃果皮中含有较多的过敏原，果肉中较少，解释去皮可以有效降低过敏原含量。果实成熟进程一般增加过敏原含量，在完全成熟时达到最大。60多份桃核心种质材料进行3年过敏蛋白的定量分析，比较不同品种类型和起源等与过敏蛋白含量的关系，发现南方水蜜桃品种过敏原含量较高，油桃含量较低。一些地方老品种也较低。品种间差异最大为50倍。‘桃王’和‘沪油018’两个品种在2年的测试中均表现较低含量。根据9K SNP芯片测试基因型和过敏蛋白含量的全基因组关联分析，发现有2-3条染色体关联，说明为数量性状。LTP所处的第6条染色体位置与过敏蛋白含量有较大关系，低过敏品种类型和品系有特殊的单倍型，可以进一步挖掘转化为育种标记。此外，对另一类桃Pru p 1三个异构型进行重组表达，理化性质验证，发现一个新的组分Pru p 1.02具有更高的血清IgE结合活性。.项目执行期间已经发表国际论文3篇，获得省级二等奖1项。参加项目有3个博士和2个硕士生。