雌激素受体介导的沙苑子温阳化浊调节肝脏TG代谢的机制研究

As the conventional Yang-Reinforcing herbs, SHAYUANZI is able to resolving turbidity and regulating blood lipid for warming kidney yang and assisting qi transformation. Previous research has shown that SHAYUANZI could decrease the level of TG of the ovariectomized hyperlipidemia rats, at the same time the mRNA expression of liver ER-α and ER-β are significantly decreased. So this study will take the ER as the breakthrough point and take estrogen as the control, and observe the effect of total flavonoids of SHAYUANZI on liver TG synthesis, transport and hydrolysis in ovariectomized hyperlipidemia rats. To analyze the possible mechanism of SHAYUANZI in regulating blood lipid by detecting channels as follow: TG synthetic SREBP-1c-FAS-ACC-GPAT and PPARα-CPT-1α-ACO, TG transporting HNF4α-MTP-ApoB100-VLDL and TG hydrolysis PPARγ-ATGL-HSL. At the same time we use hepatocytes cultured in vitro, using ER blocking agent, to observe the effect of SHAYUANZI on the above channels and its correlation with ER, comparing the differences between estrogen and SHAYUANZI, to investigate the mechanism of warming yang and regulating blood lipid of SHAYUANZI, to reveal scientific connotation of pharmacological of reinforce yang herbs and to clarify the characteristics and advantages of reinforce yang herbs in regulating blood lipid.

沙苑子为传统补阳药，可通过温肾阳，助气化达到化浊降脂之功。前期研究表明，沙苑子对去势高脂大鼠具有显著的降TG作用，对雌激素虽无明显升高，但却能显著增加肝脏ER-α和ER-β mRAN的表达。因此，本课题以ER为切入点，以雌激素为对照，观察沙苑子总黄酮对去势高脂大鼠肝脏TG合成、转运、水解的影响，通过检测调控TG合成SREBP-1c-FAS-ACC-GPAT和PPARα-CPT-1α-ACO，转运HNF4α-MTP-ApoB100-VLDL和水解PPARγ-ATGL-HSL等通路，分析沙苑子可能的降脂机制；同时采用体外培养肝细胞，利用ER阻断剂，观察沙苑子对以上通路的影响及其与ER的相关性，比较沙苑子与雌激素对肝脏TG代谢作用途径和靶点的异同，分析中药补阳药与雌激素替代疗法的不同之处，探讨沙苑子温阳化浊的调脂机制，揭示补阳药药性理论的科学内涵，并阐明中药补阳药调节血脂的特色和优势。

背景：绝经后女性脂质代谢紊乱常用雌激素替代疗法，该法虽然疗效确切，但长期服用会出现较大的副作用。而中医多用补肾阳法，沙苑子为传统补阳药，可通过温肾阳，助气化达到化浊降脂之功。内容：本项目在中医药理论指导下，以雌激素受体为切入点，以雌激素为对照，分别从体内实验和体外实验两个部分探讨沙苑子的降脂作用特点。体内实验采用去卵巢高脂大鼠模型，观察沙苑子总黄酮对肝脏 TG 合成[SREBP-1c-脂肪酸合成酶（FAS）-乙酰辅酶A 羧化酶（ACC）-甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)]，[PPARα-肉毒碱棕榈酰转移酶（CPT-1α ）-乙酰辅酶 A 氧化酶（ACO）]、转运[HNF4α-微粒体甘油三酯转运蛋白（MTP）-载脂蛋白 B（ApoB100）-极低密度脂蛋白（VLDL）]、水解[PPARγ -脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）-激素敏感性脂肪酶（HSL）]三条途径的影响，探讨了沙苑子的降脂机制；体外实验采用人肝L02细胞，观察沙苑子苷A对以上TG合成、转运、水解三条途径的影响，并利用雌激素受体阻断剂，探讨沙苑子苷A降脂作用与雌激素受体的相关性，比较了沙苑子与雌激素对 TG 代谢途径和作用靶点的异同。结果：沙苑子可通过调节核受体SREBP-1c、PPARα、PPARγ的表达，抑制肝脏中 TG 的合成，增加其转运速率和水解，从而减少TG在肝脏的沉积；沙苑子与雌激素的作用靶点不同，沙苑子不能直接提高机体内E2水平，能上调雌激素受体的表达，可以在一定程度上弥补雌激素水平的不足，使得受体后信号传导的作用放大而产生降脂作用；沙苑子不仅通过经典的ER途径来调控TG合成的，还存在其他的作用途径，可能是直接作用于雌激素受体后通路，或者是通过启动ER内不同于雌激素的其他结构域表达来激活ER，即通过其他途径激活ER。意义：从整体、组织、细胞、分子不同层面探讨了沙苑子的降脂作用机制，阐明了补阳药沙苑子温阳化浊的科学内涵，以及补阳药调节血脂的特色和优势，为沙苑子的临床应用提供科学依据，具有学术价值和临床指导意义。