云药“七龙天”对HPH缺氧诱导血管新生的多点调控研究

针对云南高原地区低氧相关性肺动脉高压（HPH）所关联疾病高患病率的现状，把HPH形成的关键机制- - 缺氧诱导血管新生作为研究切入点，采用常压低氧法诱发SD大鼠HPH模型，选择有云南民族医药特色的复方"七龙天"（云南文山三七、迪庆香格里拉红景天等）进行干预性实验研究。通过改良右心导管术测定肺血流动力学参数；运用免疫组化和RT-PCR技术检测缺氧诱导血管新生过程的4组关键因子：缺氧诱导因子（HIF-1α）、炎症因子（IL-1β、TNF-α）、血管张力调节因子（NOS、ET-1）、血管新生因子（VEGF、Angpt-1）在大鼠肺小动脉内膜中的蛋白表达及缺氧肺组织中的 mRNA 表达；以Weidner方法测定肺组织微血管密度（MVD）。以期阐明七龙天多点调控缺氧诱导血管新生的作用机制，可望为防治HPH提供新的思路和实验依据，为促进云南民族医药发展做一点努力。

低氧相关性肺动脉高压(HPH)是COPD、慢性肺源性心脏病疾病进程中的关键环节，影响着COPD和CCP的发展及预后。此类疾病患病率高，疾病负担沉重，已成为区域性重大疾病问题。因此，迫切需要寻求切实可行的防治方法。目前研究提示缺氧诱导血管新生与HPH关系极为密切，将是HPH研究领域新的研究方向。课题组使用具有云南民族特色的中药复方“七龙天”应用于COPD患者，取得理想疗效。前期实验也证实七龙天可显著降低实验性PAH，其作用机制，尤其对缺氧诱导血管新生机制的多点调节作用亟待深入研究。.主要内容及目的：进行“七龙天”的制备工艺研究；观察“七龙天”对实验性HPH大鼠的药效学作用；探讨“七龙天”对缺氧诱导血管新生致HPH的多靶点作用机制。.方法：研究一：七龙天制备工艺流程研究. 研究二：七龙天对HPH大鼠药效学作用及机制研究.结果：七龙天最佳提取工艺组合为AⅢBⅢCⅡDⅢ，即：在乙醇浓度70%、提取时间2h、提取次数3次、料液比1：10的条件下提取率最高。即10倍70%的乙醇，回流3次，每次2小时；七龙天可降低HPH大鼠的PASP、PADP、MPAP(P<0.05或P<0.01)，抑制HIF-1α、IL-1、TNF-α、ET-1、VEGF 、Angpt-1的mRNA及蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01)，上调NOS的mRNA及蛋白表达水 (P<0.05或P<0.01)，以七龙天大剂量组最为显著，优于波生坦(P<0.05或P<0.01)。.结论：该工艺在大生产中简便易行，制剂稳定性好，可作为该制剂的制备工艺方案。基于云南民族医药特色的复方“七龙天”能够有效降低HPH大鼠的PAH，呈剂量依赖方式，综合疗效优于波生坦。其作用机制与抑制HIF-1α、IL-1、TNF-α、ET-1、VEGF 、Angpt-1的表达及上调NOS的表达水平有关。说明，七龙天可通过多靶位作用机制防治缺氧诱导血管新生所致的HPH，在慢性缺氧肺病领域极具深入研发价值。本研究将会为探索民族医药防治HPH提供新思路和理论依据。