表达核酶的转基因植物抗类病毒机理的研究

本研究的主要目标是试图证明转核酶序列的植物抗类病毒（PSTV）作用是单纯的核酶切割作用还是核酶两边的与PSTV靶子RNA互补（反义）区起作用。对原野生型核酶保守区作A-G的定点突变，合成核酶突变体，通过农杆菌介导转化植物，用PCR和分子杂交法检测确证获得表达核酶突变体的转基因植物，用PSIV接种野生型和突变体核酶转基因植物，结果说明前者接种34株有23株检测不到PSTV，11株PSTV减少，后者接种60株有59株检测列PSTV，1株PSTV减少。上述结果用P32标记的PSTVCDNA作探针作分子杂交得到证实。结果发表在美国PNAS杂志，收到40多粒国际同行来信索取该文的抽印本。另外，用组织切片和分子杂交法，初步证明表达核酶的转基因植物中，核酶转录物主要集中在细胞核内。