基于Hippo-YAP/TAZ通路探索艾灸延缓动脉粥样硬化的新机制

Atherosclerosis remains a highly prevalent and lethal risky. Moxibustion is an important therapy to treat atherosclerosis, but the mechanism is still unclear. TRPV1, that plays an important role in moxibustion, had found in impacting the signalling transduction of Hippo pathway with the downstream effectors YAP and TAZ. Based on the 973 program's results that moxibustion impacts the blood flow and promotes the function of artery, we suppose that "Moxibustion promotes the function of artery via Hippo-YAP/TAZ pathway, then reduce the signalling transduction of JNK and down-regulate the inflammatory factors, results in the atheroprotective effect ". We will use ApoE-/- mice as the atherosclerosis model, use immunofluorescence technic, real time PCR, western blot, blocking the YAP/TAZ and so on to identify the participation of Hippo-YAP/TAZ in the progress of atheroprotective effect of moxibustion. The result of this research may deeply understand the mechanism of moxibustion and offer more evidence for explain theory of moxibustion scientifically.

动脉粥样硬化是危害人类健康的主要疾病之一，艾灸是其重要的临床治疗方法，但机制仍待进一步明确。Hippo-YAP/TAZ信号通路在动脉粥样硬化形成机制中扮演重要角色。已有研究发现TRPV1在艾灸效应发挥重要作用，也被发现可能参与调节Hippo-YAP/TAZ信号的传递。根据在前期973课题研究中发现艾灸具有改善血流灌注及血管功能的作用，本研究提出假设“Hippo-YAP/TAZ通路参与艾灸改善血管功能，减弱JNK等信号传导和相关炎症基因的表达，延缓动脉粥样硬化的形成”。本研究拟以ApoE-/-基因敲除小鼠构建动脉粥样硬化模型，综合运用免疫荧光双标、荧光定量PCR、western blot、YAP/TAZ阻断等方法，以确证“Hippo-YAP/TAZ”通路在艾灸延缓动脉粥样硬化过程中的参与，为深入阐释艾灸作用原理，回答艾灸温经通络作用的现代科学内涵提供更为丰富的依据。

血脂异常升高损伤血管内皮，使脂质、巨噬细胞在血管壁发生增殖、迁移及凋亡，导致动脉粥样硬化和血管重构。既往研究已证实内皮YAP/TAZ的激活促进炎症和动脉粥样硬化，进一步诱导心脏重构，导致心脏收缩功能受损，与心律失常的发生有关。艾灸是临床治疗动脉粥样硬化重要手段，在调节脂代谢及炎症方面发挥重要作用。但关于艾灸刺激调控Hippo信号通路的研究较少，尚不清楚Hippo-YAP信号通路是否介导血脂异常升高诱导的心律失常。本研究以高脂饮食喂养载脂蛋白E敲除小鼠（Apolipoprotein E knockout，ApoE-/-）构建动脉粥样硬化模型，本研究以高脂饮食喂养载脂蛋白E敲除小鼠（Apolipoprotein E knockout，ApoE-/-）构建动脉粥样硬化模型，发现：.1.模型组自发出现室上性心律失常，发生率为60%（6/10）;艾灸明显降低心律失常发生率，为20% (2/10);.2.与模型组相比，艾灸组小鼠循环血液中T-CHO水平、体重及动脉粥样斑块程度显著降低;.3.与模型组相比，艾灸可显著降低P波时限和QTc(P<0.01);.4.与模型组相比，艾灸组LVEF、FS显著增加（P<0.05），增强心脏收缩功能，缩小异常扩大的左心室;.5.与模型组相比，艾灸显著降低ApoE-/-小鼠血浆TNF-α水平;.6.通过对主动脉不同血流动力学模式调控下的蛋白表达检测发现，与模型组相比，艾灸抑制RhoA表达，抑制YAP活性，促进YAP磷酸化。.本研究通过以上的研究表明，艾灸可能通过抑制RhoA表达，导致YAP活性抑制、YAP磷酸化，达到调控Hippo信号通路的目的，进而促进降脂、抗炎，改善心脏收缩功能，从而延缓动脉粥样硬化及心律失常的发生。本研究促进了艾灸对动脉粥样硬化相关心律失常的机制探索。