巨噬细胞选择性活化在子宫内膜异位症发生发展中的作用研究

Endometriosis is a common and recurrent illness affecting women’s reproductive health and fertility. It has been suggested that alternatively activated macrophages play important roles in the pathogenesis of endometriosis; however the underlying mechanism remains greatly unsolved. Our previous data showed that SHP2 deletion resulted in alternatively activated macrophages. The preliminary data showed Gab1, a scaffolding protein of SHP2, whose deletion suppressed alternatively activation of macrophages. With the two transgenic mouse models with defined activation of macrophages, we try to elucidate the role of macrophage activation in the implantation and growth of ectopic endometrium. Mechanistically, the intercellular interaction between endometriotic or endometrial cells and macrophages will be studied. Clinically, we try to explore the potential association between activation status of peritoneal macrophages and the fertility index, clinical stages and recurrence of endometriosis patients. Our studies will highlight the role of activated macrophages in the pathogenesis of endometriosis and its additive value in predicting of clinic outcome of endometriosis.

子宫内膜异位症是一种常见的，易复发的妇科疾病，严重影响育龄妇女的身心健康和生育。研究表明选择性活化的巨噬细胞促进异位子宫内膜的生长，但是两者间相互作用的详细机制并不清楚。我们前期研究发现巨噬细胞缺失酪氨酸磷酸酶SHP2导致巨噬细胞向选择性活化偏转，而SHP2相关支架蛋白Gab2缺失导致巨噬细胞选择性活化阻断。在此基础上，我们拟利用这两转基因小鼠，通过小鼠腹壁缝合子宫角模拟内异症的模型，研究巨噬细胞选择性活化与异位内膜的定植和生长间的关系。在细胞水平，通过共培养和条件培养基研究内膜细胞与巨噬细胞在体外的相互作用。临床研究中，利用流式细胞术探究内异症患者腹腔巨噬细胞的选择性活化程度与内异症生育指数、临床分期、复发的关联。我们的研究将进一步明确巨噬细胞的选择性活化与异位内膜定植与生长之间的关系、细胞学机制及临床价值。

前期研究表明支架蛋白Gab2是巨噬细胞选择性（M2）活化的重要调控基因，我们利用小鼠和细胞模型，深入研究了Gab2在巨噬细胞选择性（M2）活化中的作用及机制，研究结果表明，M2活化的巨噬细胞中Gab2表达升高，Gab2可能通过参与JAK1/STAT6信号通路从而调控巨噬细胞M2活化，Gab2缺失后小鼠体内巨噬细胞M2活化减弱，提示Gab2在巨噬细胞M2活化中起到关键作用。酪氨酸磷酸酶SHP2及支架蛋白Gab2是与巨噬细胞选择性活化密切相关的分子，我们研究了SHP2、Gab2在子宫内膜异位症中的表达、定位情况，并探究其与增殖标志Ki67、血管新生标志VEGF及临床指标的相关性。SHP2、Gab2的免疫组化结果表明：SHP2主要在对照组、在位和异位子宫内膜的子宫内膜腺上皮中显示胞质和细胞膜染色，异位和在位子宫内膜表达增加。Gab2在对照组、在位和异位子宫内膜的子宫内膜上皮和间质中显示胞浆染色，在异位和在位子宫内膜中表达增加。在子宫内膜组织中SHP2和GAB2的表达呈显著正相关， SHP2和VEGF均呈显著正相关，GAB2和VEGF正相关相关性，与Ki67不相关。在该部分研究中，我们发现在异位和在位子宫内膜中蛋白酪氨酸磷酸酶SHP及其上游衔接蛋白GAB2表达增加，提示GAB2-SHP2轴调节VEGF可能参与了子宫内膜异位症的发生发展。该部分研究结果是首次有关GAB2和SHP2的上调与子宫内膜异位症有关的研究报告。表皮生长因子（EGF）是巨噬细胞活化的调控重要细胞因子之一，我们研究表明III/IV期子宫内膜异位症患者血清EGF和透明质酸浓度高于I/II期或无子宫内膜异位症患者。免疫组化法检测到p-EGFR、HAS2的表达在异位内膜中高于在位内膜。机制上，细胞模型中EGF可上调HAS2和透明质酸的表达，同时促进的细胞迁移和侵袭。该部分研究提示EGF可增加子宫内膜异位症相关透明质酸及其合酶HAS2的表达，介导了EGF诱导异位子宫内膜间质细胞的迁移和侵袭，从而在子宫内膜异位症的发生发展中具有正向作用。.