人染色体7q36区域男性同性恋行为相关基因的精细定位研究

Human sexual orientation is highly influenced by genetic factors. At present, there were no reported candidate genes for MSM (men who sex with the men) behaviour, though 7q36 region had be located as MSM-related regions through the two genome-wide arrays based on sib pair of MSM in Caucasian populations. MSM genetic studies had not yet been reported in the Chinese population as well. .In this study, we took the 7q36 region as the candidate region and used the strategy of "two-step" method to study the issue. First, we took GoldenGate technology and selected a high-density SNPs locus covering the 7q36 region to initial screen of related genes or loci of MSM developing, in 240 MSM cases and 240 normal heterosexual controls. Second, according the result of the first step, we identified and fine mapped the 7q36 region with MSM associated genes, locus and related haplotypes through time of flight mass spectrometry (MS-TOF) technology in a larger sample size (760 MSM cases and 760 controls). .In this study, the high-density markers will be performed to fine-mapping MSM-related genes in a large group of MSM, providing useful clues to the genetic mechanism of gene level to explore and explain the MSM behavior.

人类性倾向的选择在很大程度上受遗传因素影响。国外已经在高加索人群中进行过两次基于同胞对的关于男性同性恋（MSM）行为的全基因组连锁分析研究，将其相关区域定位在7q36等多个区域，但目前没有明确的MSM相关基因被报道发现，且在中国人群中尚未有MSM遗传学研究报道。本研究拟以7q36区域为候选区域，采取"两步法"策略，第一步在240个MSM样本与240个正常异性恋对照样本中，选取高密度覆盖7q36区域的SNP位点，使用自定义芯片技术，初步筛选与MSM发生相关的基因或位点，根据筛选结果，第二步在扩大人群样本中（760 MSM个体和760对照个体），使用飞行时间质谱技术进行验证研究，鉴定和精细定位7q36区域与MSM发生相关联的基因、位点及相关的单体型。本研究在国内外首次采用高密度SNP标记在大样本MSM群体中精细定位MSM相关基因，为从基因水平探寻和阐释MSM行为形成的遗传学机制提供有用线索。

项目的背景 同性恋是一种正常的、生物学成因未明的差异性现象及生命活动。我国卫生部门调查表明，中国男性同性恋者约占性活跃期男性人群的2%-4%，该人群现已成为性病和HIV感染的高发人群。近年来，对于同性恋形成是由遗传因素和环境因素共同决定的理论开始被研究者所关注和接受。截止2012年底，除本研究组在SHH基因及启动子区域对rs9333613基因型频率研究报告外，我国目前尚未见有其他关于MSM遗传位点的研究报道。.主要研究内容 收集整理MSM和正常男性对照样本资料，建立MSM遗传资源库,在检测区域寻找、识别和鉴定与MSM相关联的染色体位点；扩大样本量，寻找并验证可能与MSM行为发生以及HIV 易感性相关的基因或单体型。.重要结果 利用自定义芯片技术检测从MSM组和异性恋组血样提取的DNA，筛查发现COMT基因多态性位点rs4680和SHH基因多态性位点rs9333613与MSM有关，单核苷酸多态性分析均发现MSM组其等位基因、基因型相对于异性恋组差异均有统计学意义（P＜0.05）。后期扩大样本量，经时间飞行质谱法检测，筛查验证发现以下结果：1)MSM 差异SNP位点共5个，即rs1801133、rs4818、rs6265、rs6311、rs6313；2)HIV易感性SNP位点3个，即rs3775291、rs11362、rs3775291；3)单核苷酸多态性分析发现MSM组rs1657268、rs1801133的等位基因频率以及rs1657268、rs4818、rs6265的基因型频率与异性恋组比较有显著性差异（P＜0.05）。4)TLR3基因rs3775291多态性和DEFB1基因启动子多态性位点rs11362与HIV易感性可能存在关联，rs3775291位点T等位基因可能降低宿主的HIV易感性；5)成功构建DEFB1启动子- pGL3-Basic-重组质粒，能够高效地启动下游基因表达，转染rs11362-G型质粒的酶活性约为rs11362-A型质粒的1.5倍（P<0.01）。.科学意义 通过上述基因位点与MSM行为之间的相关性分析结果，为从基因水平为探寻和阐释在MSM行为形成中遗传因素的作用和遗传学机制提供科学的理论依据。进一步确定基因的功能研究，分析MSM人群相关位点及其基因突变在HIV感染和流行中的相关性奠定基础，以期最终控制相关疾病在该人群中的流行。