把新近发展迅速的RNAi技术引入植物抗病毒基因工程,并作了拓展。把来自两个不同植物病毒(PVX和PVY)的基因构建成融合基因,进而构建该融合基因的反向重复序列表达载体,农杆菌介导把融合基因反向重复序列转入马铃薯,通过Southern blot 和攻毒后的ELISA 检测,最终目的获得对两个病毒具有双重高抗或免疫的转基因植株,为获得双免疫甚至多免疫转基因植物提供新思路。通过攻毒前后的Nortern blot 和siRNA检测验证该途径的抗病机制.根据RNAi作用机理,融合基因反向重复序列转录后形成的dsRNA 结构会降解成siRNA,进而介导入侵病毒同源mRNA降解,转基因mRNA不存在或存在量很少,避免了病毒重组的风险。马铃薯无性繁殖,转基因株无性后代基因型一致,对不同植株用2个病毒同时攻毒,先后攻毒及单独攻毒,获得完整可靠的双免疫实验资料,无技术难题,试验程序简单.
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数据更新时间:2023-05-31
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