长链非编码RNA AK023391介导氧化苦参碱调控胃癌的分子机制研究

Gastric cancer (GC) metastasis is the main reason leading to the death of GC patients. Therefore, exploring molecular mechanism and therapeutic strategy of GC metastasis is a key issue which need be resolved. Recent studies show that long noncoding RNA (lncRNA) is involved in regulation of many important signaling pathways, and plays a crucial role in the development and progression of multiple malignancies. We previously screened differentially-expressed lncRNA AK023391 between GC and adjacent non-tumor tissues using lncRNA chip, and verified the effects of oxymatrine (OMT) on AK023391 and FBX032 expression and GC growth. Based on these, bioinformatics, CHIP, gene cloning, RNA interference, molecular biology, in vitro cell culture and severe combined immunodeficiency mice GC metastasis model are used to explore molecular mechanisms of AK023391-mediated OMT regulation on GC growth and metastasis. These findings may provide experimental and theoretical basis for the development of new drug target, prevention of GC metastasis and improvement of GC prognosis.

肿瘤转移是导致胃癌患者死亡的主要原因，研究其转移的调控机制及治疗是当前需要解决的关键问题之一。近年研究表明长链非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)参与多种重要信号转导的调节过程，在肿瘤发生发展中发挥重要调节功能。我们前期利用lncRNA芯片筛选胃癌、癌旁组织中差异表达lncRNA AK023391，证实其与调控肿瘤生长的抑癌基因FBXO32有关；进一步发现中药苦豆子提取有效成分氧化苦参碱在体内外均具有抗人胃癌作用，但AK023391介导氧化苦参碱调控胃癌的作用机制尚未报道。本课题拟利用生物信息学、CHIP、基因克隆、RNA干扰及肿瘤分子生物学等手段、构建重度联合免疫缺陷小鼠人胃癌转移模型，探讨AK023391介导中药氧化苦参碱调控肿瘤抑癌基因FBXO32对胃癌生长及转移的作用机制，为胃癌治疗提供新的药物靶点，并为预防其转移和改善预后提供实验依据。

背景：肿瘤转移是导致胃癌患者死亡的主要原因，研究其转移的调控机制及治疗策略是当前需要解决的关键问题之一。近年研究表明长链非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)参与多种重要信号转导的调节过程，在肿瘤发生发展过程中发挥重要调节功能。.研究内容：1) 分析lncRNA AK023391表达与胃癌患者生存预后的关系。2）探讨lncRNA AK023391对胃癌增殖、侵袭转移、凋亡、周期的作用及其调控机制；3）构建小鼠人胃癌模型，证实氧化苦参碱抗胃癌转移的作用及其对AK023391表达的影响。.重要结果：我们利用lncRNA 表达芯片筛选出胃癌-癌旁差异表达的lncRNAs，发现lncRNA AK023391差异表达最明显。进而利用FISH验证其在胃癌组织表达上调，是胃癌患者不良生存的独立预后因素。功能上，我们发现敲低lncRNA AK023391抑制胃癌细胞增殖、克隆形成、DNA合成、迁移和侵袭，诱导细胞凋亡和周期阻滞；过表达lncRNA AK023391促进胃癌细胞增殖、克隆形成和侵袭。机制上我们利用mRNA表达谱和KEGG分析筛选出lncRNA AK023391在胃癌细胞主要富集PI3K/AKT和FOXO3a通路，并证实沉默lncRNA AK023391抑制PI3K/AKT和激活 FOXO3a通路活性。最后体内动物实验进一步证实沉默lncRNA AK023391抑制裸鼠皮下移植瘤的生长。同时我们还发现，过表达lncRNA AK023391逆转氧化苦参碱的抗胃癌作用。.科学意义：我们的研究结果为胃癌不良预后提供新的靶点，为胃癌治疗提供了临床前研究结果。