分子筛选心脏自律性细胞构建心脏生物起搏的实验研究

本研究拟通过分子技术对骨髓间充质干细胞体外诱导分化的心肌细胞进行筛选，以获取纯化的心脏自律性细胞，并结合基因修饰技术，进行构建心脏生物起搏的研究。研究首先构建含α-MHC基因启动子和报告基因EGFP的真核表达载体，转染骨髓间充质干细胞，筛选稳定转染克隆。然后在体外对稳定转染的心肌细胞进行诱导，使其向心肌细胞分化，根据报告基因的表达，流式细胞分选。应用分子生物学和细胞电生理方法对分选的细胞进行鉴定，对部分细胞进行起搏通道HCN4的基因修饰。将纯化的自律性细胞移植到缓慢性心律失常的动物模型，观察心脏生物起搏的有效性、稳定性和安全性。本研究综合干细胞和基因治疗技术的优势，避免两者的不足之处，是目前构建心脏生物起搏的最新设想，其研究成果将为以后的临床前期研究奠定坚实的基础。