雌激素通过TRPC3诱导细胞内Ca2+水平促进上皮性卵巢癌侵袭和转移的研究

The major cause of death in ovarian cancer patients is metastasis and recurrence. The clinical major problems to be solved is the study of the molecular mechanisms of invasion and metastasis in ovarian cancer.Our previous studies have found that estrogen stimulation the EOC cells can make its enhancement in proliferation and invasive ability.But the mechanism remains unclear. Then the gene chip screening the effects on estrogen stimulation EOC cell lines, observed that level of TRPC3 transcription is increased. With the further research on tumor invasion and metastasis, We bring forward the hypothesis that estrogen may combine with estrogen receptor, increased TRPC3 on ovarian cancer cells, and increased TRPC3 mediated SOCE process, resulting in Ca2 + increases in tumor cells, and regulate the development of invasion and metastasis process in ovarian cancer.We are going to study on the estrogen promote the invasion and metastasis of EOC relevant biological processes by TRPC3 using molecular biology and other technologies, explore known and unknown pathway of the invasion and metastasis in ovarian cancer, and clarify the mechanism of the invasion and metastasis from the molecular level.

卵巢癌的复发转移是导致患者死亡的主要原因，因此研究其可能机制是目前临床亟待解决的重大问题。本课题组前期研究发现雌激素剌激体外培养的EOC细胞株可使其增殖和侵袭能力增强，但其具体机制仍不清楚。随后采用基因芯片筛查雌激素刺激EOC细胞后TRPC3转录水平升高。随着对肿瘤侵袭转移研究的深入，我们首次提出雌激素可能通过结合雌激素受体，上调了卵巢癌细胞上的TRPC3受体，而增多的TRPC3介导SOCE过程，从而导致肿瘤细胞内Ca2+升高，并调控了卵巢癌的发生发展及侵袭转移过程，这对于卵巢癌的研究无疑是全新的认识。本课题拟借助分子生物学等技术深入研究雌激素通过TRPC3发挥促进EOC侵袭转移相关的生物学过程，丰富EOC发生与发展的雌激素相关假说，并为基于TRPC3相关的靶向治疗EOC提供一定的理论依据，进一步使我们从多层面多角度理解上皮性卵巢癌发生侵袭和转移的机制，为卵巢癌的治疗提供新的思路。

卵巢癌是女性生殖器常见的三大恶性肿瘤之一，其死亡率高，尤其是上皮性卵巢癌（EOC），其被发现时往往处于中晚期，而目前对其发生发展的分子机制尚不清楚。本研究主要内容为探索 TRPC3和雌激素受体（ER）在EOC组织中的表达，分析TRPC3、ER表达和EOC患者预后的关系，研究雌激素和TRPC3在不同人源EOC细胞株增殖侵袭能力中的作用以及具体分子机制。我们的研究结果显示， TRPC3 在 EOC 组织中较良性对照组中表达增高， 且TRPC3 高表达与 EOC 患者较晚 FIGO 分期及较高病理分级有关，说明TRPC3 可能在 EOC 进程中起到一定促进作用。TRPC3 阳性表达在单因素分析中与EOC患者较短的 OS 有关，提示TRPC3 阳性表达可能是 EOC 患者 OS 预后不良的预测因子；ERβ阳性表达在单因素及多因素分析中与患者较短的 PFS 均有关，提示 ERβ阳性表达可能是 EOC 患者 PFS预后不良的独立危险因素；TRPC3（-）且 ERβ（-）与较长的 OS 及 PFS 均有关，提示二者联合可能较单一指标预测 EOC 患者预后更准确、全面。进一步的体外实验研究显示雌激素可通过作用于雌激素受体调节TRPC3表达进而增强EOC细胞株的增殖、侵袭能力，雌激素刺激显著升高EOC细胞株中TRPC3的表达，而TRPC3 siRNA降调TRPC3表达后降低EOC细胞株增殖侵袭能力。进一步的钙成像实验我们得出雌激素可能通过激活TRPC3通道进而升高细胞内钙离子浓度从而发挥增强细胞增殖、侵袭的能力的作用。另外，我们将人EOC细胞株TRPC3 基因下调后检测到 EMT 相关分子 β-catenin 和 Snail 的表达同时也显著下降，下调 TPRC3 可显著的上调 BMPR2 蛋白表达，提示 TRPC3 可能经过介导 BMPR2 相关信号通路，进一步激化其下游相关蛋白来促进 EOC 恶性生物学行为。我们的研究结果为今后EOC患者的预后评估提供初步的临床实验依据，丰富 EOC 发生与发展的雌激素相关假说，并为基于 TRPC3 相关的靶向治疗 EOC 提供一定的理论依据，进一步使我们从多层面多角度理解 EOC 发生侵袭和转移的分子机制，为卵巢癌的治疗提供新的思路。