热休克蛋白27对多巴反应性肌张力障碍GTP环化水解酶1基因突变显性抑制效应的影响

多巴反应性肌张力障碍（DRD）是一种遗传性锥体外系疾病，临床上易与早发型帕金森病混淆。本病多数由GCH1基因突变所致，呈常染色体显性遗传，显性抑制效应可能在其发病中占重要地位，虽然其具体的调控机制仍不明确，但如对其进行有效干预，有望通过降低DRD的外显率从而成为本病治疗的全新靶点。研究发现磷酸化热休克蛋白27（HSP27）可能抑制GCH1突变的蛋白表达量，但其能否干预GCH1基因的显性抑制效应仍不明确。本项目立足于我们前期发现的GCH1基因三个新突变Leu91Val、Val204Gly、628delC，构建突变表达质粒，研究瞬时转染真核细胞时GCH1蛋白的表达水平、细胞内定位及酶活性，明确GCH1新突变是否具有显性抑制效应，磷酸化HSP27能否干预这些突变蛋白的显性抑制效应，及其可能的干预机制，以揭示HSP27干预对DRD外显率的影响，也为阐明DRD显性抑制效应的具体调控机制打下基础。

多巴反应性肌张力障碍（DRD）是一种遗传性锥体外系疾病。本病多数由三磷酸鸟苷酸环化水解酶1（GCH1）基因突变所致，虽然DRD是常染色体显性遗传模式，存在外显率不全现象，显性抑制效应可能在其发病中占重要地位，其具体的调控机制仍不明确。前期研究发现磷酸化热休克蛋白27（HSP27）可能抑制GCH1突变的显性抑制效应。本研究紧密围绕DRD GCH1基因突变及热休克蛋白对GCH1蛋白突变功能影响这一核心问题开展。主要工作包括对中国汉族人群DRD家系GCH1基因突变分析。在基因突变检测的基础上对DRD临床特点进行分析，分析DRD临床表型与基因突变之间的关系，对其GCH1蛋白的临床表型进行分析。对突变GCH1蛋白功能研究，证实突变GCH1蛋白在表达水平上不存在显性抑制效应，而酶活性水平上628delC突变蛋白存在显性抑制效应，而磷酸化的热休克蛋白HSP27不能干预这种显性抑制效应。同时,本研究建立DRD 尿细胞模型，为进一步DRD机制研究奠定基础。