MeCP2蛋白复合物及其磷酸化机制研究

MECP2基因突变导致Rett Syndrome(RTT)。RTT是一种与X-染色体连锁，发病于出生后6－18月女婴，具有自闭症(Autism)行为的脑神经系统发育障碍症。病人逐渐失去语言和运动功能。MeCP2的功能,MeCP2突变是如何引发RTT等问题并不清楚。我们利用抗体免疫沉淀方法和质谱技术，首次免疫纯化内源性MeCP2,发现MeCP2磷酸化现象。揭示了MeCP2 S80（S80)磷酸化在调节MeCP2功能上的作用。我们将探索S80磷酸化细胞信号传导基理，力争为RTT的治疗寻找靶位点。RTT是脑发育障碍症。而RTT病人和正常人脑组织MeCP2蛋白质复合物；人脑组织MeCP2磷酸化等都是研究的空白点。本项目将揭示RTT病人脑组织MeCP2蛋白质复合物及其磷酸化状况,为阐明MeCP2与RTT的发病基理提供线索，最终有助于更好地理解包括自闭症在内的人类重大疾病发生发展的表观遗传学机制

MeCP2是DNA结合蛋白，是重要的表观遗传学表征分子。MeCP2突变导致Rett syndrome，一种好发于1岁左右女孩的脑发育障碍症,Rett syndrome 的发病机理并不清楚。.利用本实验室研制的7种不同免疫原的MeCP2抗体，采用本实验色独特的抗体免疫沉淀方法，结合质谱技术从小鼠大鼠脑组织及人心脏组织中发现新的endogenous MeCP2复合物:.1) RNA splicing的蛋白质复合物.2) 突触蛋白；.3) DNA top蛋白；.4) histone proteins;.在S80A磷酸化突变体小鼠脑组织发现如下MeCP2结合蛋白：.1) casein kinase;.2) DNA 受伤结合蛋白.3) V-type 蛋白.4) sodium/potassium-transporting 蛋白.提示MeCP2 S80A 突变体动物与野生型在功能上的差异，结合不同的功能蛋白，形成不同的MeCP2蛋白质复合物。.除了蛋白质复合物研究，我们还开展了ChIP-seq研究，我们以小鼠小脑，海马以及大脑皮层的不同功能区分别研究MeCP2对其靶基因的调控，以期充分理解MeCP2对脑组织的转录调控作用。.作为本项目的延伸，我们与北京大学分子医学研究所熊敬维实验室合作开展了MeCP2在斑马鱼发育作用的研究。实验数据显示MeCP2基因表达抑制后，严重影响斑马鱼早期发育，出现脑部，脊柱以及尾部异常.我们发现斑马鱼MeCP2抑制与Notch信号通路相关，进一步与her2等基因相关。