靶向结肠癌流感病毒载体的分子基础研究

The objective of this research project aims at the existing problem of the colorectal cancer therapy in our country. Apoptin, a tumor-selective killer, serve as antitumor drug. Attenuated Influenza virus acts as gene delivery vector with many merits, including high transfection efficiency, multiple antigenicity and no risk of carcinogenesis. Further more, influenza virus hemagglutinin gene will modified and the influenza virus vector which targeted colorectal cancer will be constructed by reverse genetic system. The vector also has reliable security. Meanwhile, the antigenicity of influenza virus vector can be exchanged with other strains by antigen change platform. In order to overcome some critical problems in clinical treatment by virus vector, such as the poor effect of reuse, poor targeting ability and the obvious side effect. We anticipate that the influenza virus vector we improved will play the significant role in colorectal cancer gene therapy.

本项目针对我国高发的结肠癌及其治疗上存在的诸多问题，选用特异性杀伤肿瘤细胞的凋亡素为治疗药物，以转染性强、抗原性多、无致癌风险的减毒性流感病毒为载体，并对流感病毒血凝素蛋白进行定向改造，通过反向基因操作技术构建出靶向性强、安全性高的抗结肠癌的减毒性流感病毒载体。同时，流感病毒载体可通过创建的抗原更换平台进行抗原更换，克服病毒载体在基因治疗中重复使用效果不理想和靶向性差副作用大的临床使用瓶颈，预期将在大肠癌的基因治疗上发挥重大作用。

本项目针对我国高发的结肠癌在治疗上存在的诸多问题，如常规化疗存在靶向性差和副作用多的缺陷，研发一种靶向性强、安全性高、效果明显的基因治疗生物药品作为最终目标。本项目选用特异性杀伤肿瘤细胞的凋亡素为治疗基因，以转染性强、抗原性多、无致癌风险的流感病毒为载体，并对流感病毒血凝素蛋白进行定向改造，通过反向基因操作技术构建出一个靶向性强、安全性高的针对大肠癌基因治疗的减毒性流感病毒载体。. 本项目五个主要研究内容是：1）构建携带外源性抗肿瘤基因的载体性流感病毒；2）流感病毒的减毒化研究；3）流感病毒的靶向性研究；4）构建抗原更换平台；5）构建流感病毒抗原鉴别诊断平台。. 通过以上五个方面的研究获得了主要研究成果是：. 1）获得了多个携带抗肿瘤基因的流感病毒载体候选株。该候选株具有以下的生物特性：（1）弱毒性（比原病毒下降了70% ）；（2）能特异性靶向大肠肿瘤细胞；（3）能更换抗原性；（4）对大肠肿瘤细胞杀伤作用，而对正常细胞抑制作用较底。基本符合病毒载体基因治疗的生物特性，可以用于原创性I.I类新药的进一步研究开发。. 2）构建了流感病毒抗原更换平台。该平台可用于病毒载体的抗议更换，克服病毒载体在基因治疗中重复使用效果不理想和靶向性差副作用大的临床使用瓶颈，预期将在大肠癌的基因治疗上发挥重大作用。另外，可以用于新型载体疫苗的研发。. 3）初步构建了流感病毒抗原鉴别诊断平台。该平台预计划构建抗原和单克隆抗体各26个，现在已完成了23个抗原和14个单克隆抗体。通过该平台研发一个流感病毒快速诊断和鉴别诊断的试剂盒。该试剂盒不仅用于流感病毒载体基因治疗的配套，有可以用于禽流感疫情的预警。