HBV抗原特异性记忆型Th17细胞的表型和功能研究

研究慢性乙肝持续性感染的分子和细胞机制具有重要的科学和实用 意义。Th17是新近发现的促进炎症、提供炎性保护的重要的CD4+T辅助细胞亚系；抗原特异性记忆型Th17对细菌和真菌感染具有确定的保护意义；IL-22（Th17的效应细胞因子之一）缺失后，小鼠肝细胞对炎性损伤极度敏感，发生自发性肝炎；目前，抗原特异性记忆型Th17在慢性乙肝持续性感染的病程中的表型和功能都不清楚。本项目拟通过分选乙肝病毒隐匿感染后和慢性乙肝感染个体的HBV抗原特异性的IL-17+细胞及T细胞克隆方法，鉴定其记忆型表型，比较在自然无症状感染后、疫苗接种后、慢性乙肝持续性感染和慢性乙肝急剧发作个体表型差异，结合临床表征及肝内其他效应细胞因子的分泌情况，分析其功能及在慢性乙肝持续性感染病程中的贡献，预期的实验结果可能为理想的慢性乙肝治疗策略的建立提供新的思路，并可能找到新的免疫干预治疗或疫苗作用的靶细胞。

本项目着力于定义在慢性乙肝疾病中的记忆型Th17的表型和在疾病进程中的作用，即究竟主要是促损伤，还是在保护的同时促进了损伤。本项目一直都在不断推进，各项研究目标都经过详细探索，在不同的学术高度给出了答案。当然，通过不断跟进国内外的研究进展，以及综合考虑不同研究进程的学术意义后，我们侧重于研究诱导记忆型Th17分化的关键始动因素IL-1β的产生机制，希望通过对Th17在局部分化产生机制的调查这样一个全新的角度，对HBV特异性Th17的表型以及伴随的功能状况有较深入的研究和认识。研究的主要结果如下：1 在正常人群中，Th17细胞仅约1.1±0.4%；而在慢性乙肝感染人群中约1.9±0.6%；这群细胞主要位于CD45RA-CD4+T细胞群体中，此为传统的记忆型T细胞亚群；充分说明记忆型Th17在慢性乙肝肝损伤中具有重要的贡献。2 HBV特异性记忆型Th17细胞主要以CCR6+（33.7±1.4%），CD62L+(39.5±2.0%)为表型，CCR7+仅约（19.7±1.3%）或更低。很遗憾IL-1RI的流式染色在正常人或病人中都未见到阳性。因此，在慢性乙肝病人中记忆型Th17主要以CCR6+CD62L+为主，呈现效应记忆细胞的表型。3 IL-1β与Th17的分化密切相关，是向Th17分化的重要始动因素，尤其是记忆T细胞群体在局部的向Th17分化；活化的caspase-1是切割IL-1β原型，产生成熟的IL-1β的主要原因。慢性乙肝病人血浆中的p20和caspase-1的活性明显升高，导致IL-1β的分泌增多，这是病人肝脏局部Th17升高的重要原因，很可能是记忆型T细胞到局部后被诱导分化而成，所以以效应型记忆细胞为主。IL-1β与肝损伤各相关指标有明显正相关关系，说明靶向caspase-1的治疗策略可能参与抑制IL-1β的产生，从而抑制Th17的分化。