HSV-1TK缺失株的构建及其杀伤神经胶质瘤细胞机理探讨

本课题扩增出HSV-117SYN(+)毒株TK基因全部编码区为1，128bp,并构建成TK基因部分缺失的载体以及构建成HSV-117syn(+)tk(-)突变株，经鉴定表明TK基因已缺失295bp。经对体外感染神经胶质瘤细胞的杀伤作用，结果HSV-ltk(-)突变株浓度与杀伤率成一定依赖关系，与时间也有关。但效果与国外文献报导比较还不够理想。根据国内外进展本课题构建成pLTRNL介导HSV-1 TK基因长期稳定转染人肝癌细胞系，经一系列的鉴定以及用抗HSV-1 TK免疫血清荧光染色TK转染细胞均呈阳性。用MTT法测定ACV对转染TK基因肿瘤的杀伤作用，在一定剂量下杀伤率可超过80%以上，并且有明显的旁路效应。根据国内外文献报导以HSVtk(-)突变株与HSV-1 TK基因/逆转录病毒载体，二者杀伤神经胶质瘤细胞的效果值得进一步探讨。