miR-424调控DNA修复基因APTX致宫颈癌放射抵抗的研究

放疗是宫颈癌主要的治疗方法，放射抵抗问题是宫颈癌放疗的重点和难点。miRNA在肿瘤诊断、疗效预测和治疗靶点确定等研究中具有独特优势。我们前期建立了宫颈癌的放射耐受细胞株，用miRNA芯片检测放射耐受株与亲本株之间表达的差异，结果发现miR-424在放射耐受株中显著下调。首先，miR-424在宫颈癌组织中呈特异性低表达；其次，我们预测发现miR-424的靶基因包括APTX等DNA修复基因，及CDC14A、CDC25A等细胞周期调控基因，而这两条途径是肿瘤放射抵抗的重要原因；再次，APTX是BER通路中的重要基因，修复烷化剂和氧化剂引起的DNA损伤。所以，我们推测miR-424可能是致宫颈癌放射抵抗的关键miRNA。本课题拟采用荧光素酶报告基因系统等技术，确证APTX是miR-424的靶基因，并进一步探讨miR-424在宫颈癌放射抵抗中的作用，为宫颈癌放疗增敏基因治疗提供理论和实验基础。

放疗是宫颈癌主要的治疗方法，放射抵抗问题是宫颈癌放疗的重点和难点。miRNA 在肿瘤诊断、疗效 预测和治疗靶点确定的研究中具有独特优势。我们前期的研究发现miR-424在放射耐受株中显著下调。通过生物信息学预测发现BER 通路中的重要基因APTX可能是miR-424的下游靶基因，通过调节APTX的表达水平，在宫颈癌放射抵抗行为中发挥重要的作用。本课题采用荧光素酶报告基因系统、WB等技术，确证APTX是 miR-424 的靶基因，并构建miR-424慢病毒表达载体，通过MTT、凋亡检测、彗星实验、克隆形成分析等体外实验，显示miR-424能显著增加Hela细胞对放射线的敏感性，再通过建立裸鼠移植瘤模型，在体外进一步证实了该实验结果，为宫颈癌放疗增敏基因治疗提供了一定的理论和实验基础。