tPA-VEGF165 cDNA双基因静电纺丝纳米涂层瓣膜预防机械瓣膜置换术后血栓形成的实验研究

机械瓣膜是最常用的人工瓣膜，但术后抗凝并发症严重威胁患者生命。为避免全身抗凝治疗的缺陷，申请者设想通过在心脏局部持续转染和表达抗凝基因来抑制术后血栓形成：构建pIRES-tPA-VEGF165双基因质粒，与前期制备的具有体内缓释质粒特性的交联明胶微球结合形成pIRES-tPA-VEGF165双基因质粒－交联明胶微球复合物，并通过静电纺丝技术将其喷涂于机械瓣膜缝合环表面形成纳米涂层。随瓣膜植入体内后，通过交联明胶静电纺丝纳米涂层持续缓释pIRES-tPA-VEGF165双基因质粒，在超声靶向介导基因转染技术辅助下，一方面通过转染tPA基因抑制血小板聚集；另一方面通过转染VEGF165基因促进瓣周内皮细胞增殖和加速缝合环内皮化；两者协同抑制术后血栓形成。本项目将实现基因治疗与纳米材料制造技术的有机结合，为机械瓣膜置换术后抗凝治疗开辟新的领域，为研制无需长期全身抗凝治疗的基因瓣膜奠定实验基础。