狂犬病毒糖蛋白在转基因小鼠中的特性研究

构建了含狂犬病病毒糖蛋白(Rg)cDNA的质粒pmMT-Rgp和pMT010/A(+)-Rgp后，转染BHK21细胞，经PCR、打点杂交及ELISA检测，证明该基因发生了整合并能表达，上述质粒给小鼠肌注射可产生抗Rg 特异性抗体。从pMT010/A(+)-Rgp双酶切出仅含MT启动子、Rgp及PolyA的片段，通过显微注射，导入受精卵雄前核，经胚胎移植共获得44只小鼠。PCR、Southern及原位杂交传代试验证明，有9只为转基因小鼠。免疫组化表明，表达的Rg主要分布于肝实质细胞的胞浆和细膜上，对其中一个高表达鼠系用灭活狂犬病病毒接种，表明产生了免疫耐受。本项研究在国内首次进行了狂犬病的裸基因免疫，为今后相应工作开展打下了坚实基础，所命名的转基因动物已被国际相应机构所收录。