从Naftopidil对映体诱导雄激素代谢探讨抗良性前列腺增生新靶点

Androgen-androgen receptor signals play vital roles in the initiation and progression of benign prostate hyperplasia (BPH). Inhibiting the production of androgen was proved to be an effective target. It is speculated that promoting androgen elimination may be another possible target. Naftopidil, a α1D-adrenoceptor blocker, is utilized extensively for lower urinary tract symptoms (LUTS) caused by BPH. However，the mechanism for inhibiting prostate cell proliferation has not been clarified. Our previous study had revealed that UDP- Glucoronosyltransferase (UGT) 2B7 is the principal enzyme responsible for naftopidil enantiomer metabolism. Interestingly, UGT2B7 also catalyze androgen to form inactive metabolize in vivo and vitro. Our study also found that naftopidil enantioselectively induces UGT2B7 in vitro. Consequently, we speculate that naftopidil could enantioselectively promote the metabolism of androgen, then inhibit prostate hyperplasia. Based on the point of drugs metabolic interaction, the present study will study the mechanism which naftopidil regulate the activity and expression of UGT2B7 and transcription factor Nrf2, CAR, FXR and investigate the influence on androgen metabolism. This study will indicate a new mechanism inhibiting BPH of naftopidil and a superior enantiomer. These results may contribute valuable information for new targets discovery and clinical rational medication.

雄激素-雄激素受体通路是良性前列腺增生发生发展的关键。抑制雄激素生成是已发现的抗前列腺增生靶点，推测促进雄激素代谢为另一靶点。Naftopidil是治疗良性前列腺增生的一线用药，其改善下尿路症状的作用机理已经明确，而抑制前列腺细胞增殖作用机制尚未明确。我们的研究发现，naftopidil与活性雄激素均主要由UGT2B7代谢，且naftopidil对UGT2B7活性有对映体选择性激动作用。推断naftopidil可能通过上调UGT2B7，促进雄激素代谢发挥抗前列腺增生作用，且存在优势异构体。本项目拟从药物对内源性物质代谢的相互作用入手，明确naftopidil对映体对体内外雄激素代谢的影响，并研究NAF对映体对UGT2B7及其转录因子Nrf2、CAR和FXR的调节作用，阐明NAF对映体抗良性前列腺增新靶点，明确该作用中的优势异构体。为新靶点的发现和优势异构体的开发提供依据。

雄激素-雄激素受体通路是良性前列腺增生发生发展的关键。抑制雄激素生成是已发现的抗前列腺增生靶点，推测促进雄激素代谢为另一靶点。Naftopidil是治疗良性前列腺增生的一线用药，其改善下尿路症状的作用靶点已经明确为α1肾上腺素受体拮抗，而抑制前列腺细胞增殖作用靶点及机制尚未明确。我们前期研究发现，naftopidil与活性雄激素均主要由葡萄糖醛酸化转移酶UGTs代谢，且naftopidil对UGT2B7活性有对映体选择性激动作用。推断naftopidil可能通过上调UGT2B7，促进雄激素代谢，进而发挥抗前列腺增生作用。该作用中可能存在优势异构体。.本项目从药物对内源性物质代谢的相互作用入手，明确了naftopidil对映体代谢通路及其对体内外雄激素代谢的影响，并研究了naftopidil对映体对雄激素代谢终端酶UGT2Bs的活性以及表达的影响，明确了naftopidil作用下转录因子Nrf2、CAR和FXR对UGT2Bs的调节作用。阐明naftopidil对映体抗良性前列腺增新靶点，明确该作用中的优势异构体。为新靶点的发现和优势异构体的开发提供依据。.本研究发现，1. 葡萄糖醛酸化代谢是naftopidil对映体的低生物利用度的主要原因。其中，最主要的代谢产物是NAF-G（原型药物的葡萄糖醛酸化）。S(-)-NAF葡萄糖醛酸化速率高于R(+)-NAF，但代谢量低于R(+)-NAF。2. NAF葡萄糖醛酸化主要发生在肝和肾，肠代谢贡献小；UGT2B7是NAF对映体代谢主要酶，UGT2B4是NAF对映体选择性代谢的原因所在——UGT2B4主要参与S(-)-NAF代谢，而几乎不参与R(+)-NAF代谢。3.在动物和细胞水平上，NAF对映体能够上调UGT2B7和UGT2B15的表达，相应地增强了活性雄激素的葡萄糖醛酸化代谢。4. 在人源肝细胞和前列腺细胞中， NAF对映体分别通过转录因子FXR和AR上调UGT2Bs的表达。.综上所述，本研究发现NAF对映体不仅是UGT2Bs的底物，同时还能通过转录因子FXR和AR上调UGT2Bs水平，从而促进活性雄激素ADT,3α-DIOL,ETIO等的代谢失活，进而发挥NAF对映体抗前列腺增生的作用。上述作用的优势异构体为S(-)-NAF。本研究发现该发现突破了细胞信号通路和细胞因子等传统研究思路，提出以促进雄激素代谢失活为靶点的抗