MALT1和A20基因异常对MALT和弥漫大B细胞淋巴瘤演进过程的影响

NFκB异常活化是MALT和弥漫大B细胞淋巴瘤演进的重要因素。MALT1和A20基因异常在两种淋巴瘤中很常见，并对两种淋巴瘤的NFκB活化产生明显影响。我们以往研究发现MALT1在上述两种淋巴瘤中异常表达，而且与NFκB靶基因BCL2表达及肿瘤的临床过程有关。推测两种基因异常可能通过活化NFκB而使NFκB靶基因MMPs和mdr异常，从而影响淋巴瘤的侵袭力和化疗效果。本研究以DLBCL细胞株为研究材料，建立MALT1基因高表达细胞株，用蛋白抑制剂及A20siRNA处理细胞株，进行移植瘤裸鼠体内侵袭实验及体外侵袭实验、体外耐药实验、侵袭和耐药相关因子检测；研究两种淋巴瘤病例，检查MALT1表达、A20基因缺失及甲基化并随访。通过上述研究，可以完善相应淋巴瘤的演进机制，为临床寻找DLBCL治疗有意义的靶点奠定基础，为寻找有意义的MALT和弥漫大B细胞淋巴瘤预后估计和疗效预测相关因子提供实验依据

近年来发现MALT淋巴瘤和弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）存在NFκB和STAT3的异常活化,存在于两种淋巴瘤中的MALT1和A20异常都可能影响其NFκB活化,MALT1对A20蛋白有酶解作用。本研究以DLBCL和Burkitt细胞及MALT淋巴瘤和DLBCL病例为研究材料,用多种方法处理细胞,建立裸鼠移植瘤模型,进行肿瘤侵袭实验、体外耐药实验及相关因子检测;检查两种淋巴瘤组织中A20基因异常、Survivin,Pgp,P65等蛋白表达并随访。结果发现:1.加入PMA/IONO后:OCI-LY8及OCI-LY1细胞的生长明显受到抑制。OCI-LY1细胞内MALT1蛋白表达无明显变化,但A20蛋白表达升高,细胞凋亡明显增多,细胞周期阻滞,穿膜肿瘤细胞的OD值明显降低。Z-VRPR-FMK刺激未见上述改变;Z-VRPR-FMK刺激Raji细胞后A20蛋白表达升高;A20siRNA转染后的OCI-LY1细胞在长春新碱（VCR）的作用下P65表达上调、凋亡减少,mdr1基因和Pgp的表达降低,但降低程度不及未转染细胞;IL-6促进Raji和OCILY8细胞生长、使Survivin和TIMP1mRNA和蛋白表达上调,AG490刺激后结果相反。2.在AG490作用下,Raji和OCI-LY8移植瘤鼠的pSTAT3及VEGF蛋白降低;在IL-6作用下,survivin及VEGF蛋白表达均明显升高。Raji移植瘤pSTAT3、VEGF蛋白表达增高。3.MALT淋巴瘤和DLBCL的A20基因错义突变率约18%,缺失突变率约16%。A20突变与DLBCL细胞的来源、临床分期、IPI指数、细胞增殖活性、Pgp表达有关;A20甲基化率为26%,也与DLBCL细胞的来源,pgp表达有关;在MALT淋巴瘤中A20蛋白阳性表达降低,在DLBCL中更甚。P65及Survivin阳性表达则与A20相反;A20基因甲基化和Survivin蛋白阳性表达的DLBCL病例复发率较高,A20和Survivin与病人生存状况有关。结果表明:PMA+Iono对GCB样DLBCL细胞的生长有抑制作用,可能与其增加细胞内A20蛋白的表达有关,与MALT1蛋白水解酶活性无关。上调A20蛋白表达可能是GCB样DLBCL治疗的一个新思路;A20和Survivin可能与DLBCL的发展和预后相关。