血小板活化因子（PAF）激活的信号通路在多囊肾病囊泡形成和肾小管间质病变中的作用及其机制研究

ADPKD is considered to be the most common life-threatening monogenic inherited disease，accounted for the 4th cause of end-stage renal failure in China. Currently, in addition to the application kidney transplant and dialysis treatment of end-stage renal failure, there is no effective drugs to prevent ADPKD progression. On the previous basis that PAF receptor blockers ginkgolide B（GB） significantly inhibited cyst formation and growth and the increases of PAF-R protein levels in Pkd1 knocked mice, we take the lead in put forward the working hypothesis " PAF-PAF-R signaling pathways involved in regulating PKD pathological change especially in cyst development and tubulointerstitium pathological changes through the interaction between PAF-PAF-R and cAMP-PKA signal pathways. By using the established MDCK cyst model,embryonic kidney model and Pkd1 knockout mice model,we take renal interstitial disease of PKD as the main obeservation index in molecular,cellular, organ and whole organism different levels, to study the effect and mechanisms of PAF-activated pathways on cyst formation and tubulointerstitial disease in PKD, looking for new drug therapeutic targets,clarifing the mechanism of PAF receptor blockers GB in PKD treatment and providing valuable theoretical and experimental basis for effective prevention and control PKD.

ADPKD被认为是最常见的危害人类生命的单基因遗传病，占我国终末期肾衰竭病因的第4位。目前，除应用肾移植和透析治疗终末期肾衰，尚无阻止ADPKD发生、发展的有效药物。本课题组在前期发现PAF受体阻断剂银杏内酯B(GB)明显抑制囊泡形成和生长以及Pkd1小鼠肾脏PAF-R表达水平升高基础上，率先提出"通过PAF-PAF-R和cAMP-PKA信号通路的相互作用，PAF激活的信号通路参与调节PKD的病理过程尤其是囊泡生长和肾小管间质病变"的工作假说。在分子、细胞、器官、整体不同水平上，采用已经建立的离体MDCK囊泡模型、胚胎肾模型和Pkd1基因敲除小鼠模型，以PKD肾间质病变为主要观察指标，对PAF介导的信号通路在PKD囊泡形成和肾小管间质病变中的作用及其机制进行研究，寻找新的PKD药物治疗靶点，为阐明GB治疗PKD的作用机制，研发有效防治PKD发生、发展的药物提供有价值的理论和实验依据。

ADPKD是最常见的威胁人类健康和生命的单基因遗传性肾病，发病率高达1/1000-1/400，占我国终末期肾衰竭病因的第4位（全球第三位）。ADPKD病程长，给患者和社会造成的经济负担较大。目前，除对症治疗和应用肾移植和透析治疗终末期肾衰，尚无阻止ADPKD发生、发展的有效药物。本项目通过采用Pkd1基因敲除小鼠、胚胎肾囊泡模型、MDCK囊泡模型及MDCK细胞，从分子、细胞、器官和整体水平，系统地评价了多个前期筛选得到的小分子化合物的抑制囊泡形成和生长的作用，并对其作用机制进行了研究。目前，已经证实候选化合物中PAF抑制剂银杏内酯B，姜黄素和灵芝三帖等小分子化合物具有明显的抑制囊泡形成和生长作用。它们的作用机制与抑制PAF/cAMP-PKA 活化的下游Ras/Raf/ERK和mTOR 信号通路密切相关。同时，也发现TGF-beta-Smad/non-Smad信号通路和EMT参与了PKD囊泡的形成和肾脏间质纤维化的发生和发展，而PAF/cAMP-PKA信号具有双向作用。上述研究结果发表了多篇SCI收录论文，撰写了综述文章、申请了灵芝三帖治疗PKD的专利，培养了3名硕士研究生和3名博士研究生。.尽管ADPKD发生的遗传学病因已经很明确，Pkd1或Pkd2突变导致肾囊泡的发生、发展及其终末期导致肾衰的病理生理机制尚不明确。因此，我们对出生后第一天的Pkd1基因敲除小鼠肾脏进行了蛋白质组学研究，发现了一些候选靶蛋白，后续研究正在进行中，已经有一篇SCI收录论文正在审稿中。总之，本项目为今后进一步深入研究ADPKD发病机制，对发现预防或延缓ADPKD发病，甚至逆转其病程的新药物靶点具有重要意义，并奠定了良好的基础。