蜻蜓肠道菌的免疫抑制成分及其构效关系研究

Insect gut microorganisms are kinds of special eco-environment microbes which are rarely studied and the important source of new immunosuppressants. The immunosuppressive compounds produced by two species of gut microorganisms from dragonfly will be isolated and elucidated by the methods of modern chromatogram, spectrum, organic chemistry and microbiology in this project. In addition, the structure-activity relationships of active metabolites will also be uncovered. According to the performance of the project, the immunosuppressive chemical base of the gut microorganisms from dragonfly will be explored and the immunosuppressive lead compounds will also be discovered. Besides,the medicine, organic chemistry and microbiology will be developed further from the basic study of immunosuppressant innovation.

昆虫肠道菌是一类研究较少的特境微生物，是新型免疫抑制物质的重要来源。本项目拟采用现代色谱、波谱、有机化学和微生物学等相关技术对2株蜻蜓肠道菌的免疫抑制成分进行追踪分离和结构解析，并明确所得活性化合物的构效关系。本项目的实施既可揭示所研究蜻蜓肠道菌免疫抑制的化学本质，又有望发现新型天然免疫抑制先导化合物，还会从创新免疫抑制药物药物的基础研究方面推动我国药学、有机化学、微生物学等相关学科的进一步发展。

本项目主要对蜻蜓相关肠道真菌及其内生细菌的多样性和4株蜻蜓相关肠道真菌的免疫抑制成分或其它活性成分进行了研究，具体分述如下：.1. 从黄蜻幼虫肠道中共分离并鉴定了48株肠道真菌，分属于4大类，11种不同属，其中包括一株潜在新菌种。进一步在48株真菌菌种中共获得有14株内生细菌的16S DNA序列，测序结果表明大多数细菌属于变形菌。.2. 从蜻蜓成虫肠道真菌Aspergillus terreus QT122中分离得到5个化合物：emodin (1), 1-methyl emodin (2), terrein (3), methyl 6-acetyl-4-methoxy-7,8-dihydroxynaphthalene-2-carboxylate (4)和dihydrogeodin (5)。免疫抑制活性测试表明，当测试浓度为20 μM时，化合物3-5对T细胞的生长抑制效果与阳性对照环胞菌素A (CsA)相当，抑制率均高达99%；化合物3对反枝苋和稗草的抑制效果最好，抑制活性的IC50值分别为11.2 μg/mL和3.1 μg/mL。.3. 从黄蜻肠道真菌Paraphaeosphaeria sp QTYC11中分离鉴定了9个化合物，包括1个新化合物lunatoic acid C。该新化合物对反枝苋和稗草具有很好的抑制活性，其IC50分别为10.2和5.9µg /mL；新化合物对苹果腐烂病菌(IC50 = 3.3 µg/mL)，小麦赤霉病菌(IC50 = 1.7 µg/mL) 和黄瓜枯萎病菌(IC50 = 4.2 µg/mL) 具有很好的抑制活性。.4. 从黄蜻幼虫肠道真菌Curvularia crepinii QTYC-1中分离得到1个新化合物3,4,7,8,9,10-hexahydro-7,8,9,14,16-pentahydroxy-3-methyl-(1)和5个已知化合物，新化合物具有很好的除草活性，对稗草抑制活性的IC50值为0.74 μg/mL；新化合物也具有很好的抗苹果树腐烂病菌活性，在供试浓度为100 µg/mL时，其抑制率为100%；从黄蜻幼虫肠道真菌Neosartorya aureola QTYC38的固体发酵产物中分离纯化得到4个化合物，其中化合物helvolic acid对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC分别为3.1和1.5 μg/mL。