残基水平研究超大孔道介导的蛋白质吸附和结构变化

超大孔微球介质是药用蛋白大规模分离纯化最具潜力的新型层析介质之一,目前其研究大多停留在成孔工艺创新和操作通量等的考察上，而对孔结构介导的蛋白失活规律研究则尚未开展。本项目以超大孔微球为模型，通过设计氢氘交换核磁共振及层析行为相联合的新型表征路线，突破以往仅能从色谱峰型推断蛋白失活机理或离线检测蛋白不可逆失活等局限，从残基水平上深入研究微球孔结构（孔道大小、孔道表面亲疏水性、荷电性）介导的蛋白质微观去折叠机理及宏观保留行为，以此为指导对超大孔微球孔道、配基密度和类型进行调控，将其发展为新型抗失活的反相、疏水和离子交换介质。本项目所获规律不但为超大孔微球同时也为其他新型结构介质的孔结构设计提供指导和理论依据。

超大孔道是蛋白大分子分离纯化最具潜力的新型层析介质性能之一,目前其研究大多停留在成孔工艺创新和操作通量等的考察上，孔结构介导的蛋白失活规律研究尚未开展。针对这一现状，本项目以各种多孔微球为模型，通过设计氢氘交换核磁共振、石英晶体微天平、分子模拟及层析行为等多尺度技术相联合的新型表征路线，突破以往仅能从色谱峰型推断蛋白失活机理或离线检测蛋白不可逆失活等局限，从残基水平上深入研究了微球孔道结构（包括孔径和配基密度等）介导的蛋白质微观去折叠机理及宏观保留行为，以此为指导对超大孔微球孔道、配基密度和蛋白类型等进行调控，所获规律不但为超大孔微球并且对于其他材料的孔结构设计都提供指导和理论依据。