内蒙古绒山羊皮肤干细胞定位、迁移及次级毛囊重建期干细胞分化启动的调控机制

本项目拟研究绒山羊皮肤干细胞的分布位置、迁移轨迹以及筛选并鉴定在毛囊尤其是次级毛囊周期性退行-重建过程中干细胞分化启动-休眠的调控基因。①通过对表皮细胞DNA作BrdUrd或3H-T标记，利用免疫组化染色或放射自显影，确定干细胞巢在初级毛囊和次级毛囊上以及表皮基层内的位置。采用标记技术追踪源于初级毛囊和次级毛囊干细胞巢（如果存在）的干细胞各自在组织内的分化迁移走向，从而探测其迁移路经，建立整个毛囊周期中皮肤干细胞的分化模型；②构建次级毛囊退行与重建时期的差异表达基因文库，用反向Northern杂交筛选次级毛囊重建前后的差异表达基因；③运用RNA干涉，确定次级毛囊发育启动的功能基因，用RACE快速扩增技术克隆所选功能基因并验证其功能。本项目研究结果可为绒山羊及其他毛被动物的基因工程育种提供理论基础。