OTUD7B基因表达异常与外周T细胞淋巴瘤的疗效和预后的相关性及机制研究

In China, peripheral T-cell lymphoma is common with poor prognosis using conventional chemotherapy and devoid of effective targeted agents. Therefore, it is imperative to clarify its drug-resistance mechanism and explore novel therapeutic targets. Our prior study demonstrated NF-κB activation significantly influence the treatment outcomes. Although various stimulation including EB virus infection could induce NF-κB activation, the intrinsic gene dysfunction plays an important role. Recently, the deubiquitinase OTUD7B was proved to be a pivotal regulator of NF-κB pathway. We analyzed 37 cases of peripheral T-cell lymphoma and found patients with low OTUD7B was associated with poor tumor response and 2-year survival, suggesting OTUD7B might be a key predictive factor of treatment outcomes. In the present study, we plan to evaluate the prognostic value of OTUD7B in a larger patient population. More importantly, we will detect relevant factors of OTUD7B through immunohistochemistry, gene mutation and hypermethylation examination, trying to clarify the correlation between OTUD7B gene dysfunction and NF-κB activation pathways. Through this study, we are able to analyze the molecular mechanism which could impact the treatment outcomes, and to provide backgrounds for novel therapeutic target exploration in the future.

外周T 细胞淋巴瘤国内高发，对常规化疗疗效较差并缺乏有效的靶向治疗药物，因此阐明其耐药机制并探索新的治疗靶点非常必要。我们的前期研究显示NF-κB 激活是一个影响疗效的重要因素，各种刺激如EB 病毒感染都可以引起NF-κB 激活，而内在负调控基因功能的缺失起到关键的作用，其中去泛素化酶卵巢肿瘤结构域蛋白7B（OTUD7B）就是一个重要的NF-κB 通路负向调控因子。我们前期在37 例外周T 细胞淋巴瘤患者的研究中发现OTUD7B 低表达患者的肿瘤缓解率和2年生存率均低，提示OTUD7B 可能是一个关键的疗效和预后预测因素。本课题拟通过扩大样本量，进一步验证其相关性，并通过免疫组化、基因突变、甲基化检测及NF-κB 相关指标的检测，结合过表达和RNA干扰等分子技术阐明Otud7b 基因表达异常与NF-κB 的激活以及激活类型的关系，分析影响患者疗效和预后的分子机制，指导临床探索新的治疗靶点。

外周T细胞淋巴瘤（peripheral T cell lymphoma, PTCL）是非霍奇金淋巴瘤中预后相对较差的一种类型，我国的发病率比欧美国家高，也缺乏有效的靶向治疗药物，严重威胁国人健康。因此，寻找与PTCL化疗疗效和疾病预后相关的因子，对于探索PTCL治疗新靶点、开展个体化治疗、提高患者疗效和延长病人生命具有非常重要的理论和现实意义。我们的研究发现，在152例外周T细胞淋巴瘤中，去泛素化酶OTUD7B表达缺失的发生率约为34.8%。进一步分析OTUD7B与疗效和预后的关系发现，OTUD7B低表达的患者5年无进展生存时间（PFS）和5年总生存时间（OS）均较OTUD7B高表达的患者差，提示OTUD7B低表达与患者预后差相关。检测53例NKT细胞淋巴瘤组织中OTUD7B的表达，结果显示，12例患者低表达OTUD7B， OTUD7B低表达的发生率约为22.6%。进一步的分析表明，OTUD7B低表达患者和高表达患者的5年PFS分别为10%和46%（p=0.021），5年OS分别为36%和72%（p=0.007）。提示在NKT细胞淋巴瘤中，OUTD7B低表达的患者预后也相对差。进一步的实验表明，下调OTUD7B能使外周T细胞淋巴瘤细胞MJ对化疗药物阿霉素的敏感性降低，凋亡细胞比例降低，证实OTUD7B的确与淋巴瘤细胞对化疗药物的敏感性相关。通过免疫组化、Western Blot、免疫共沉淀和免疫荧光的方法，探讨其可能的机制，发现OTUD7B通过使TRAF2和TRAF3去泛素化，抑制NF-κB信号通路中P65和P52的核转运，进而调控细胞增殖、凋亡相关基因。为了优化临床用药方案，我们筛选淋巴瘤治疗过程中常见的药物，检测其对OTUD7B表达的影响，结果显示，阿糖胞苷可以上调OTUD7B，且通过联合用药实验，发现阿糖胞苷和阿霉素具有协同作用；西达本胺能够显著下调OTUD7B，联合用药实验表明西达本胺和阿霉素有拮抗作用。上调OTUD7B可以增加阿霉素的敏感性，且阿糖胞苷可能提高OTUD7B低表达患者的疗效，提示在外周T细胞淋巴瘤的一线治疗中可以探索使用含阿糖胞苷的方案，有可能会改善患者的预后。