mTOR信号路径的活化在急性淋巴细胞白血病对糖皮质激素耐药发生中的作用及机制

糖皮质激素（GC)能特异性诱导恶性淋巴母细胞增殖停滞和凋亡, 一直是治疗ALL的首选药物之一。但淋巴白血病细胞对GC耐药是临床上常见的治疗难题。课题组前期体外细胞水平研究结果表明，mTOR路径激活能诱导淋巴肿瘤细胞对GC产生耐药，而抑制mTOR活性能逆转细胞对GC的耐药性,并促使其凋亡。为了在体内细胞水平进一步明确ALL细胞GC耐药是否也与mTOR活化相关，探讨mTOR活化诱导GC耐药的分子机制，我们拟采用GC敏感和GC耐药的各种细胞株，以及GC敏感和耐药的ALL患者的白血病细胞标本作为研究对象，比较研究敏感细胞和耐药细胞（株）在mTOR激活和抑制情况下，GR?配体、凋亡相关基因表达，以及细胞周期和细胞对GC敏感性的变化情况，阐明GC耐药的新的下游机制，探索发现逆转GC耐药的方法，为提高ALL和其他淋巴源性恶性肿瘤的临床疗效奠定重要理论基础，具有十分重要的科学意义和临床应用前景。

通过对多种糖皮质激素（GC）耐药和敏感淋巴白血病/淋巴瘤细胞株的研究，揭示了mTOR信号路径异常活化为淋巴细胞白血病/淋巴瘤GC耐药的普遍性分子生物学异常现象，显示mTOR抑制剂雷帕霉素（R)联合地塞米松（Dex）显著增强GC的细胞毒效应，主要通过调控糖皮质激素受体（GR）下游凋亡和细胞周期相关蛋白的表达水平，诱导细胞凋亡和G0/G1细胞周期阻滞这一GR下游共同性效应机制，有效逆转多种淋巴白血病细胞GC耐药性。通过对GC耐药和敏感淋巴白血病细胞和ALL患儿GR表达情况以及抑制mTOR活性对GR表达的调控研究，发现GC耐药细胞存在GRα自身诱导缺陷，为GC耐药的重要环节。R联合Dex显著上调GC耐药细胞株GRα mRNA和蛋白表达，恢复GRα自身诱导效应，充分显示GC生物学效应依赖性的GRα为决定GC敏感性/耐药性的交汇点，恢复GRα自身诱导效应为逆转GC耐药的关键靶点。对临床ALL患儿GRα及异构体GRbeta、GRα上游转录调节分子B细胞易位基因1（B cell translocation gene 1，BTG1）和下游关键性凋亡调控分子X连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis，XIAP）脑急性白血病胞浆基因（brain and acute leukemia cytoplasmic, BAALC）及糖酵解代谢酶丙酮酸激酶2（pyruvate kinase muscle 2，PKM2）表达水平的研究，初步显示GRα低表达为临床上中高危ALL总体预后差、GC耐药发生率高的重要原因；BTG1高表达与ALL不良预后因素密切相关，干预糖酵解代谢途径可有效逆转GC耐药。通过以上研究，阐明了mTOR路径活化与淋巴白血病细胞GC耐药的关系及机制，初步揭示了GC耐药发生的重要环节和调控机制，雷帕霉素联合地塞米松在临床逆转GC耐药方面具有重要应用前景，为临床有效逆转淋巴造血肿瘤GC耐药提供了新思路，发表中英文学术论6篇，培养研究生2名。