肺动脉高压内皮素ETA受体治疗性疫苗的研制

Therapeutic vaccine has the potential to develop into a new effective and inexpensive method for treatment pulmonary arterial hypertension (PAH). This study will design a kind of peptides targeted endothelin ETA receptor (ETAR) which plays important roles in the pathogenesis of PAH, the peptides will be screened in vitro and the peptides which the antibody after immunization could block ETAR but not others will be selected, then the selected peptides and the virus like particle carrier packed with the strongest immune adjuvant CpG-ODNs will be coupled into PAH vaccine. The effectiveness and safety of the PAH vaccine will be observed in vivo by immunizing the PAH rat models, and be studied in vitro by observation the affinity, function and signal pathway of vascular smooth muscle cells and endothelial cells caused by the antibodies against PAH vaccine. The mechanism of PAH vaccine reduced pulmonary artery pressure also will be elucidated in these process. In the end, the inexpensive therapeutic PAH vaccine with effectiveness and safety will be prepared and be developed into a new method for treatment PAH.

目前迫切需要寻找有效价廉的新方法治疗肺动脉高压（PAH），治疗性PAH疫苗有可能成为PAH研究的新领域。内皮素ETA受体（ETAR）在PAH发病中占重要地位，本课题将设计一种ETAR短肽，体外筛选出免疫后产生的抗体能阻断ETAR而不阻断其他受体的短肽，与包裹有最强免疫佐剂CpG-ODNs的病毒样颗粒载体结合制备成PAH疫苗。免疫PAH大鼠模型，在体观察疫苗的有效性和安全性；制备抗疫苗抗体，体外观察该抗体对血管平滑肌细胞、内皮细胞等亲和力、功能和信号通路的影响，离体观察疫苗抗体的有效性和安全性，并初步阐明PAH疫苗降低肺动脉压的机制。从而研制出安全、有效的针对ETAR靶点的PAH疫苗，降低肺动脉压力、改善右心功能，为PAH的治疗提供新方法。

肺动脉高压是一种慢性致死性疾病。现有针对肺动脉高压的药物虽然有一定的治疗效果，但其预后仍不尽如人意，所以急需一种新型的治疗肺动脉高压治疗方法。治疗性疫苗的运用为肺动脉压高的治疗提供了新方法。内皮素系统的异常尤其是内皮素及其内皮素受体的异常与肺动脉高压的发生发展密切相关；内皮素A型受体是一种G蛋白偶联受体，其胞外第二环(ECL2)在受体的活化中起了至关重要的作用，所以该位置成为了设计针对内皮素A型受体进而治疗肺动脉高压的理想靶点。本研究通过大量前期工作基础及数据比对，最终选择了内皮素A型受体胞外第二环上的一段长度为10个氨基酸的短肽（EC10）作为靶点；通过人工合成EC10、载体病毒颗粒VLP与EC10的偶联制备成针对内皮素A型受体的肺动脉高压治疗性疫苗ETRQβ-002，免疫野百合碱（MCT）诱导的肺动脉高压大鼠和缺氧诱导的肺动脉高压小鼠，观察抗体滴度、血流动力学改变和相关脏器的病理改变，评估疫苗的有效性和安全性。与没有免疫ETQβ-002的肺动脉高压模型动物进行比较，结果表明ETRQβ-002疫苗能显著的降低两种肺动脉高压模型动物的右室压，改善甚至逆转肺动脉重构和右心室肥厚，而且没有发现明显的器官免疫损害和肝肾功能异常；说明ETQRβ-002是一种有效并且安全的治疗肺动脉高压的治疗性疫苗。