叶酸配基-磁性纳米粒表面自组装构建的递次双靶向给药系统研究

本项目制备磁/叶酸受体介导递次双靶向纳米药物释放载体，以实现外加磁场下载药纳米粒由血液循环系统富集到病灶部位,叶酸受体介导下进一步内吞到肿瘤细胞内释放药物。载药磁性纳米粒的构建方式上，采用原子转移自由基聚合（ATRP）法在单分散Fe3O4纳米粒表面引入大量环氧基团，然后将β-环糊精化学接枝在Fe3O4纳米粒表面，作为药物的亲和位点；叶酸配基的接枝方式上，采用聚乙二醇将金刚烷和叶酸配基相连，基于金刚烷和β-环糊精分子间强烈的识别包合作用，实现叶酸配基在磁性纳米粒表面自组装。对纳米载体进行荧光标记，采用共聚焦显微技术追踪体外细胞共培养、荷瘤裸小鼠尾静脉给药过程中递次双靶向纳米载体和负载药物的细胞内吞性能，观察其在组织细胞中的分布、靶向定位；采用活体生物萤光成像技术，实时观察、评估给药后肿瘤细胞的生长，研究载药双靶向给药系统对肿瘤的抑制和治疗效果，为提高肿瘤的靶向给药奠定基础。

磁性纳米粒子具有磁导靶向性，由于其与常见的化药分子间难以发生相互作用，而无法加载药物。本项目合成了单分散磁性纳米粒子，表面引发ATRP反应获得聚合物壳层，再经化学反应引入药物亲和位点-环糊精（Fe3O4@CD），提高载药量，延缓药物释放。研究确定了接枝药物亲和位点磁性纳米粒子合成条件；通过气流辅助电喷雾技术制备了磁性纳米粒子@聚(乳酸-乙醇酸)（Fe3O4@PLGA）复合纳米粒子，研究了电喷雾条件、PLGA浓度、分子量对粒子形态的影响。药物加载和释放性能研究表明，在壳层引入环糊精作为药物亲和位点提高了药物加载量，药物释放速率随之降低；气流辅助电喷雾技术制备的Fe3O4@PLGA粒子具有较好的药物包封性能，药物释放速率缓慢。体外细胞共培养技术研究了Fe3O4@CD、Fe3O4@PLGA粒子的生物相容性，结果表明，两种粒子的毒性评价为1级，具有良好的生物相容性。药物加载的磁性纳米粒子静注如实验动物，测定了血液中药时曲线，计算了药动学参数。磁导靶向性要求加载药物的磁性粒子在富集到药物作用部位前释放量尽可能少，本项目在磁性纳米粒子表面引入药物可亲和的有机壳层，提高了药物加载量，延缓了药物释放速率，为发展新型磁导靶向纳米药物传递系统奠定了科学基础。