nNos基因作为神经元细胞核Nogo-A蛋白的靶标研究

本项目以申请者发现Nogo-A蛋白定位神经元细胞核染色质上的实验事实为基础，以Gal-Luc(荧光素酶报告基因)和SELEX（Systematic Evolution of Ligands ，指数富集的配基系统进化）技术已经证明Nogo-A蛋白氨基端存在转录抑制活性结构域，羧基端有DNA结合能力为依据，进一步利用染色质免疫沉淀技术证明神经元型一氧化氮合酶（nNOS）基因调控区存在Nogo-A蛋白的结合位点，使用基因转染、RNA干扰、荧光定量PCR和Western Blot等技术手段检测Nogo-A对nNOS表达的调控和探讨Nogo-A-nNOS信号途径与神经元分化、突起生长、存活和凋亡的关系。通过研究神经元型一氧化氮合酶基因作为Nogo-A分子的靶标，对于揭示神经元中Nogo-A蛋白的功能和我们建立神经元细胞核内的Nogo-A蛋白是转录因子或调节因子的假设都具有重要的理论意义。